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          目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研細(xì)胞>>原代細(xì)胞>> 復(fù)蘇/凍存兔肺動脈成纖維細(xì)胞

          兔肺動脈成纖維細(xì)胞
          • 兔肺動脈成纖維細(xì)胞
          參考價 面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          參考價 面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 品牌 YLKBIO
          • 型號 復(fù)蘇/凍存
          • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
          • 所在地 上海市
          屬性

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          更新時間:2024-07-10 10:01:18瀏覽次數(shù):161評價

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          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5*10^5
          貨號 YLK-XB0994h 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 科研 組織來源 肺動脈組織
          兔肺動脈成纖維細(xì)胞分離自肺動脈組織。肺動脈亦稱肺動脈干。在呼吸空氣的脊椎動物中,把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動脈。肺大動脈起于右心室,在主動脈之前向左上后方斜行,在主動脈弓下方分為左、右肺動脈,經(jīng)肺門入肺。

          兔肺動脈成纖維細(xì)胞

          產(chǎn)品名稱 :兔肺動脈成纖維細(xì)胞

          產(chǎn)品貨號 :YLK-XB0994h

          組織來源 :肺動脈組織

          產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


          細(xì)胞簡介:

          肺動脈成纖維細(xì)胞分離自肺動脈組織。肺動脈亦稱肺動脈干。在呼吸空氣的脊椎動物中,把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動脈。肺大動脈起于右心室,在主動脈之前向左上后方斜行,在主動脈弓下方分為左、右肺動脈,經(jīng)肺門入肺。

          肺動脈干位于心包內(nèi),為一粗短的動脈干。起自右心室,在升主動脈前方向左后上方斜行,至主動脈弓下方分為左、右肺動脈。
          左肺動脈較短,在左主支氣管前方橫行,分二支進(jìn)入左肺上、下葉。右肺動脈較長而粗,經(jīng)升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行,至右肺門處分為三支進(jìn)入右肺上、中、下葉。

          成纖維細(xì)胞(Fibroblast) 是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來。成纖維細(xì)胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。

          成纖維細(xì)胞功能活動旺盛,細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化。成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。

          剛分離的肺動脈成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中30min細(xì)胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起。6h后細(xì)胞基本貼壁好后,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團(tuán)。細(xì)胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細(xì)胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細(xì)胞質(zhì)透明,細(xì)胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。

          細(xì)胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀。細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺動脈成纖維細(xì)胞在生理條件下的主要功能包括:構(gòu)造和維持肺動脈的正常形態(tài)。合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)。組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。


          質(zhì)量檢測

          優(yōu)利科生物實(shí)驗室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。


          培養(yǎng)信息

          培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
          換液頻率 :每2-3天換液一次
          生長特性 :貼壁
          細(xì)胞形態(tài) :成纖維細(xì)胞樣
          傳代特性 :可傳5代左右。3代以內(nèi)狀態(tài)佳
          傳代比例 :1:2
          消 化 液 :0. 25% 胰蛋白/酶
          培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%


          該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


          客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作

          1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

          2. 貼壁細(xì)胞消化
          1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
          2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
          3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
          4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
          3. 細(xì)胞收貨脫落
          1) 收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
          2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
          3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
          4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
          5) 原瓶內(nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
          4. 細(xì)胞實(shí)驗

          因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實(shí)驗器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實(shí)驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。


          注意事項

          1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

          2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
          3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
          4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑?,個別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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