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          目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研細胞>>原代細胞>> 復(fù)蘇/凍存小鼠輸卵管上皮細胞

          小鼠輸卵管上皮細胞
          • 小鼠輸卵管上皮細胞
          參考價 面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準
          參考價 面議
          具體成交價以合同協(xié)議為準
          • 品牌 YLKBIO
          • 型號 復(fù)蘇/凍存
          • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
          • 所在地 上海市
          屬性

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          更新時間:2024-07-10 08:03:01瀏覽次數(shù):234評價

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          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5*10^5
          貨號 YLK-XB0938h 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 科研 組織來源 輸卵管組織
          小鼠輸卵管上皮細胞輸卵管是卵子運輸、儲存、獲能,以及卵母細胞采取、運送、成熟、受精和早期胚胎發(fā)育的重要場所。輸卵管上皮細胞體外培養(yǎng)可以用于飼養(yǎng)層細胞,與胚胎共培養(yǎng),克服胚胎的發(fā)育阻滯現(xiàn)象。因此,體外培養(yǎng)輸卵管上皮細胞,不但可以進一步了解影響生殖微環(huán)境變化的因素,而且還可以建立輸卵管上皮細胞與胚胎共培養(yǎng)體系,研究輸卵管上皮細胞對胚胎體外發(fā)育的影響。

          小鼠輸卵管上皮細胞

          產(chǎn)品名稱 :小鼠輸卵管上皮細胞

          產(chǎn)品貨號 :YLK-XB0938h

          組織來源 :輸卵管組織

          產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶


          細胞簡介:

          輸卵管上皮細胞分離自輸卵管組織。輸卵管位于子宮底兩側(cè),包裹在子宮闊韌帶上緣內(nèi)。自子宮兩角分別伸展至左、右卵巢,是輸送卵細胞進入子宮的管道,也是卵受精的場所。輸卵管主要分漏斗部、壺腹部、峽部和子宮部,管壁均由粘膜、肌層和漿膜三層組成。粘膜形成許多縱行而分支的皺襞,壺腹部的皺襞Z發(fā)達,高而多分支,故管腔不規(guī)則。至子宮部的皺襞漸減少。粘膜上皮為單層柱狀。由纖毛細胞和分泌細胞組成。

          纖毛細胞以漏斗部和壺腹部最多,至峽部和子宮部逐漸減少,纖毛向子宮方向擺動,使卵移向子宮并阻止病菌進入腹膜腔. 分泌細胞表面有微絨毛,頂部胞質(zhì)內(nèi)有分泌顆粒,其分泌物構(gòu)成輸卵管液。輸卵管上皮細胞在卵巢雌激素和孕激素的作用下,隨月經(jīng)周期而有變化。雌激素促進輸卵管上皮細胞的生長的功能活動,在子宮內(nèi)膜增生晚期(排卵前) 。纖毛細胞變成高柱狀,纖毛增多,分泌細胞頂部充滿分泌顆粒,功能旺盛。至分泌晚期,兩種細胞均變矮,分泌細胞的分泌顆粒排空,纖毛細胞的纖毛也減少。


          細胞特性
          1)組織來源于實驗動物的正常輸卵管組織。
          2)細胞鑒定:細胞角蛋白-18(CK-18)免疫熒光染色為陽性。
          3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
          4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌。
          5)細胞生長方式:鋪路石狀細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。


          質(zhì)量檢測

          優(yōu)利科生物實驗室分離的該細胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細菌、酵母和真菌等。


          培養(yǎng)信息

          包被條件 :鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm 2)
          培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
          換液頻率 :每2-3天換液一次
          生長特性 :貼壁
          細胞形態(tài) :上皮細胞樣
          傳代特性 :可傳1-2代
          傳代比例 :1:2
          消 化 液 :0. 25% 胰蛋白/酶
          培養(yǎng)條件 :氣相:空氣,95% 。C O2,5%


          該細胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


          客戶收到細胞后,請按照以下方法進行操作

          1. 取出T25細胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

          2. 貼壁細胞消化
          1) 吸出T25細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞一次。
          2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
          3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
          4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
          3. 細胞收貨脫落
          1) 收集所有細胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
          2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
          3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶內(nèi)。
          4) 待細胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
          5) 原瓶內(nèi)貼壁細胞按正常消化處理。
          4. 細胞實驗

          因原代細胞貼壁特殊性,貼壁的原代細胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進行包被,以增強細胞貼壁性,避免細胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細胞種類而定。懸浮/半懸浮細胞無需包被。


          注意事項

          1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。

          2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
          3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰/酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
          4. 建議客戶收到細胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑?,個別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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