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          目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研細(xì)胞>>原代細(xì)胞>> 復(fù)蘇/凍存小鼠尿道上皮細(xì)胞

          小鼠尿道上皮細(xì)胞
          • 小鼠尿道上皮細(xì)胞
          參考價(jià) 面議
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          參考價(jià) 面議
          具體成交價(jià)以合同協(xié)議為準(zhǔn)
          • 品牌 ATCC
          • 型號(hào) 復(fù)蘇/凍存
          • 廠商性質(zhì) 生產(chǎn)商
          • 所在地 上海市
          屬性

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          更新時(shí)間:2024-07-09 17:50:35瀏覽次數(shù):238評(píng)價(jià)

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          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5*10^5
          貨號(hào) YLK-XB0785h 應(yīng)用領(lǐng)域 化工,生物產(chǎn)業(yè)
          主要用途 科研 組織來(lái)源 尿道組織
          小鼠尿道上皮細(xì)胞分離自尿道管組織。尿道是從膀胱通向體外的管道。5×105cells/T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

          小鼠尿道上皮細(xì)胞

          產(chǎn)品名稱 :小鼠尿道上皮細(xì)胞

          產(chǎn)品貨號(hào) :YLK-XB0785h

          組織來(lái)源 :尿道組織

          產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶


          細(xì)胞簡(jiǎn)介:

          尿道上皮細(xì)胞分離自尿道管組織。尿道是從膀胱通向體外的管道。

          尿道上皮細(xì)胞主要功能:
          ① 尿道上皮細(xì)胞排列在膀胱表面,它是由高可塑性和具有多種功能特殊類型的細(xì)胞組成。
          ② 上皮細(xì)胞組成膀胱的防御系統(tǒng)與病原體接觸,它們具有多種防御機(jī)制來(lái)阻止病原體粘著,保持泌尿器溶解物的不滲透性。
          ③ 膀胱上皮細(xì)胞表達(dá)雌激素α、β受體,上皮生長(zhǎng)因子受體和纖維母細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體,在損傷和感染時(shí),這些受體對(duì)膀胱上皮細(xì)胞起著重要作用。
          ④ 能釋放許多細(xì)胞因子、免疫系統(tǒng)介質(zhì)。


          質(zhì)量檢測(cè)

          優(yōu)利科生物實(shí)驗(yàn)室分離的該細(xì)胞經(jīng)Vim entin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。


          培養(yǎng)信息

          包被條件 :鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm 2)
          培 養(yǎng) 基 :含F(xiàn)BS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
          換液頻率 :每2-3天換液一次
          生長(zhǎng)特性 :貼壁
          細(xì)胞形態(tài) :上皮細(xì)胞樣
          傳代特性 :可傳1-2代
          傳代比例 :1:2
          消 化 液 :0. 25% 胰蛋白/酶
          培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%


          該細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用優(yōu)利科生物配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。


          客戶收到細(xì)胞后,請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作

          1. 取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

          2. 貼壁細(xì)胞消化
          1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
          2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白/酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完培終止消化。
          3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完培至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
          4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培。
          3. 細(xì)胞收貨脫落
          1) 收集所有細(xì)胞懸液,1000rpm,離心5min,保留沉淀。
          2) 添加0.25%胰蛋白/酶消化液0.5mL至離心管中,重懸沉淀,放置于37℃消化3min(或4℃冰箱靜置5-7min)。消化完向離心管內(nèi)加入5ml完培終止消化。
          3) 經(jīng)1000rpm離心5min丟棄上清,用5ml完培基重懸沉淀,接種于新的培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)。
          4) 待細(xì)胞貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完培(37℃預(yù)熱)。
          5) 原瓶?jī)?nèi)貼壁細(xì)胞按正常消化處理。
          4. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

          因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實(shí)驗(yàn)器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時(shí),需要對(duì)實(shí)驗(yàn)器皿進(jìn)行包被,以增強(qiáng)細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒(méi)貼好影響實(shí)驗(yàn)。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無(wú)需包被。


          注意事項(xiàng)

          1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

          2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作。
          3. 傳代培養(yǎng)過(guò)程中,胰/酶消化時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。
          4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個(gè)倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問(wèn)題得到解決。

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