目錄:優(yōu)利科（上海）生命科學(xué)有限公司>>科研試劑盒>>PCR試劑盒>> 50T芝麻源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
| 供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 50T |
|---|---|---|---|
| 貨號 | YLK10354P | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
| 主要用途 | 科研實(shí)驗(yàn) | 中文名稱 | 芝麻源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒 |
| 英文名稱 | Sesame-Derived?Material?Probe?qPCR?Kit | 保存條件 | -20℃保存 |
| 有效期 | 12個(gè)月 | 自備試劑 | 樣品 DNA |
中文名稱：芝麻源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒
英文名稱：Sesame-Derived Material Probe qPCR Kit
產(chǎn)品及特點(diǎn)
本試劑盒可用于檢測食品或其他材料中是否有芝麻源性成分?，F(xiàn)代食品加工 工藝極大改變了食材原有的味道、氣味、色澤、紋理和質(zhì)地等特性，因此傳統(tǒng)的 感官鑒別技術(shù)已經(jīng)無法對食材的真?zhèn)芜M(jìn)行準(zhǔn)確的鑒定。同時(shí)部分食材還有致敏 性，因此基于基因檢測的快速靈敏的食材來源檢測技術(shù)將對食品監(jiān)管和安全提供 重要的保障。本公司開發(fā)了簡單快捷的芝麻源性成分探針法熒光定量 PCR 檢測 試劑盒，它具有下列特點(diǎn)：
1. 即開即用，用戶只需要提供樣品 DN/A 模板。
2. 引物和探針經(jīng)過優(yōu)化，靈敏性高。
3. 提供陽性對照，便于區(qū)分假陰性樣品。
4. 特異性高，引物是根據(jù)芝麻源性成分 DN/A 高度保守區(qū)設(shè)計(jì)，不會跟其他物 種的 DN/A 發(fā)生交叉反應(yīng)。
5. 既可用于定性檢測，又可用于定量檢測。用于定量檢測時(shí)線性范圍至少為 5 個(gè)數(shù)量級。
6. 本產(chǎn)品足夠 50 次 20μL 體系的探針法熒光定量 PCR 反應(yīng)。
7. 本產(chǎn)品只能用于科研。
規(guī)格及成分
2×Probe qPCR MagicMix ：500 μL（紅蓋）
熒光 PCR 專用模板稀釋液：1 mL（綠蓋）
超純水：1 mL（白蓋）
芝麻源性成分探針法 qPCR 引物-探針混合液：150 μL（棕色管）
芝麻源性成分探針法 qPCR 陽性對 照(1×10E7 拷貝/μL))：50 μL（黃蓋）
使用手冊：1 份
運(yùn)輸及保存低溫運(yùn)輸，-20℃保存，保存期限為 12 個(gè)月。
自備試劑樣品 DN/A。
使用方法一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品（以 10E1-10E6 拷貝/μL 這 6 個(gè) 10 倍稀釋度為例）。 由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行，千萬不能 污染樣品或本試劑盒的其他成分。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原，本 產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照，只提供無傳染性的 DN/A 片段作為陽性對照。 1. 標(biāo)記 6 個(gè)離心管，分別為 6，5，4，3，2，1。
用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液，最好用帶芯槍頭， 下同。 3. 在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(試劑盒提供)，充分震 蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。 4. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所 得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。 5. 換槍頭，在 4 號管中加入 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所 得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E4 拷貝/μL 的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。 6. 重復(fù)上面的操作直到得到 6 個(gè)稀釋度的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。
二、樣品 DN/A 的制備
7. 如果有 N 個(gè)樣品待提取，最好設(shè)置 N+2 個(gè)提取，多出的是 PC（樣品制備陽 性對照）和 NC（樣品制備陰性對照）?？梢匀￡栃詫φ盏?1000 倍稀釋液 10μL 再加上一定量的水，使總體積與待提取樣品的規(guī)定體積一致，以此作 為 PC。另外用水作為 NC。
8. 用自選方法純化樣品的 DN/A，本試劑盒跟市場上大多數(shù) DN/A 提取試劑盒兼 容。
三、Probe qPCR 反應(yīng)（20μL 體系，在樣品制備室進(jìn)行）
9.如果做定量分析并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+9 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè) 用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對照（用水做模板），6 個(gè)用于標(biāo)準(zhǔn)曲線。如果做定性分析，并且只做 1 次重復(fù)，則標(biāo)記 N+4 個(gè) PCR 管，其中 N+2 個(gè)用于上步得到的 N+2 個(gè)樣品，1 個(gè)用于 PCR 陰性對照（用 水做模板），1 個(gè)用于 PCR 陽性對照（用第 4 號管的陽性對照稀釋液做模 板）。下面只以定量分析為例描述操作步驟。
10. 在標(biāo)記管中按下表加入各成分（本表只列出一次重復(fù)。樣品管和陰性對照設(shè) 置完畢后才設(shè)置陽性對照，并且陽性對照樣品要等所有管子蓋上蓋子儲存好 后最后加）
| 成分/每管 | 樣品管 N+2 個(gè) | PCR 陰性 對照管 | 標(biāo)準(zhǔn)曲線 樣品管（1-6 管） |
| 2×Probe qPCR MagicMix | 10 μL | 10 μL | 10 μL |
| 芝麻源性成分探針法 qPCR 引物-探針混合液 | 3 μL | 3 μL | 3 μL |
| N+2 個(gè)待測 DN/A 模板 | 7 μL | ||
| 超純水 | 7 μL | ||
| 第 6 步所得標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品稀釋液 （1-6 號） | 7 μL（1 號樣到 1 號管，2 號樣到 2 號管…） |
11. 蓋上蓋子后上機(jī)，按下面參數(shù)進(jìn)行 PCR：
| 過程 | 溫度 | 時(shí)間 |
| 預(yù)變性 | 95℃ | 10 min |
| PCR 反應(yīng) （45 個(gè)循環(huán)） | 95℃ | 15 sec |
| 60℃ | 60 sec（采集 FAM 通道的熒 光信號） |
四、數(shù)據(jù)處理
12. 如果把本試劑盒用于定量檢測，則以陽性對照濃度的 log 值為橫軸，以 Ct 值 為縱軸，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。再以待測樣品的 Ct 值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上推算出樣品核 酸濃度的 log 值，再推算出其濃度。
13. 如果把本試劑盒用于定性檢測，只判斷陽性或陰性，則陰性對照 Ct 必須大 于或等于 40。陽性對照必須有熒光對數(shù)增長，有典型擴(kuò)增曲線，Ct 值應(yīng)該 小于或等于 37。對待測樣品，如果其 Ct 大于或等于 40 則為陰性，如果小 于或等于 37 則為陽性。如果在 37-40 之間，則重復(fù)一次。重復(fù)實(shí)驗(yàn)的 Ct 值如果大于或等于 40 則為陰性，如果小于 40，則為陽性。
芝麻源性成分探針法熒光定量PCR試劑盒僅供科研。
| 豬細(xì)小病毒(PPV)核酸檢測試劑盒(PCR法) |
| 非洲豬瘟（ASFV）核酸檢測試劑盒（PCR法） |
| 豬肺炎支原體（MHP）核酸檢測試劑盒(PCR法） |
| 弓形蟲(TOX)核酸檢測試劑盒(PCR法） |
| 副豬嗜血桿菌（HPS）核酸檢測試劑盒PCR法 |
| 豬傳染性胸膜肺炎（APP）核酸檢測試劑盒(PCR法) |
| 口蹄疫病毒通用型(FMDV-U)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) |
| 口蹄疫病毒亞洲1型(FMDV-Asia1)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) |
| 口蹄疫病毒O型(FMDV-O)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) |
| 口蹄疫病毒A 型(FMDV-A)核酸檢測試劑盒(RT-PCR 法) |
| 豬藍(lán)耳病病毒通用型(PRRSV-U)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) |
| 高致病性豬藍(lán)耳病病毒(PRRSV-M)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) |
| 豬瘟病毒(CSFV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) |
| 豬傳染性胃腸炎病毒(TGEV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) |
| 豬流行性腹瀉病毒(PEDV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR法) |
(空格分隔,最多3個(gè),單個(gè)標(biāo)簽最多10個(gè)字符)
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