目錄:優(yōu)利科(上海)生命科學(xué)有限公司>>科研試劑盒>>ELISA試劑盒>> 96T/48T凝血因子Ⅶ(FⅦ)ELISA檢測(cè)試劑盒
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更新時(shí)間:2024-06-27 09:56:43瀏覽次數(shù):658評(píng)價(jià)
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CAS | 詳見說明書 | 純度 | 詳見說明書 |
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分子量 | 詳見說明書 | 分子式 | 詳見說明書 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 貨號(hào) | YLK-1013E |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè) |
凝血因子Ⅶ(FⅦ)ELISA檢測(cè)試劑盒介紹:
本試劑盒僅供研究使用。
使用目的:
本試劑盒用于測(cè)定小鼠、豬、大鼠、人、兔子血清、血漿及相關(guān)液體樣本中凝血因子Ⅶ(FⅦ)含量。
實(shí)驗(yàn)原理:
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中凝血因子Ⅶ(FⅦ)水平。用純化的凝血因子Ⅶ(FⅦ)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入凝血因子Ⅶ(FⅦ),再與HRP標(biāo)記的凝血因子Ⅶ(FⅦ)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的凝血因子Ⅶ(FⅦ)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中凝血因子Ⅶ(FⅦ)濃度。
試劑盒組成:
1 | 30倍濃縮洗滌液 | 20ml×1瓶 | 7 | 終止液 | 6ml×1瓶 |
2 | 酶標(biāo)試劑 | 6ml×1瓶 | 8 | 標(biāo)準(zhǔn)品(40ng/ml) | 0.5ml×1瓶 |
3 | 酶標(biāo)包被板 | 12孔×8條 | 9 | 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 | 1.5ml×1瓶 |
4 | 樣品稀釋液 | 6ml×1瓶 | 10 | 說明書 | 1份 |
5 | 顯色劑A液 | 6ml×1瓶 | 11 | 封板膜 | 2張 |
6 | 顯色劑B液 | 6ml×1/瓶 | 12 | 密封袋 | 1個(gè) |
標(biāo)本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
操作步驟:
1. 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
20ng/ml | 5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
10ng/ml | 4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
5ng/ml | 3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
2.5ng/ml | 2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
1.25ng/ml | 1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品 | 150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液 |
2. 加樣:分別設(shè)空白孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣50μl,待測(cè)樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl(樣品最終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復(fù)5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑50μl,空白孔除外。
7. 溫育:操作同3。
8. 洗滌:操作同5。
9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色10分鐘。
10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。
11. 測(cè)定:以空白空調(diào)零,450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的吸光度(OD值)。 測(cè)定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行。
操作程序總結(jié):
計(jì)算:
以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。
注意事項(xiàng):
1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。
3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間最好控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使用排槍加樣。
4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,最好做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔第一孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定,計(jì)算時(shí)請(qǐng)最后乘以總稀釋倍數(shù)(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請(qǐng)避光保存。
7.嚴(yán)格按照說明書的操作進(jìn)行,試驗(yàn)結(jié)果判定必須以酶標(biāo)儀讀數(shù)為準(zhǔn)。
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。
9.本試劑不同批號(hào)組分不得混用。
凝血因子Ⅶ(FⅦ)ELISA檢測(cè)試劑盒保存條件及有效期:
1.試劑盒保存:2-8℃。
2.有效期:6個(gè)月。
相關(guān)產(chǎn)品:
人凝血因子Ⅶ(FⅦ)ELISA試劑盒 | Human coagulation factor Ⅶ,FⅦ ELISAkit |
人凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA試劑盒 | Human coagulation factor Ⅻ,FⅫ ELISAkit |
人凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒 | Human coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISAkit |
人凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒 | Human coagulation factor Ⅹ,FⅩ ELISAkit |
小鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒 | Mouse coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA試劑盒 |
小鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒 | Mouse coagulation factor Ⅷ related antigen,FⅧ-Ag ELISA試劑盒 |
小鼠凝血因子Ⅸ(FⅨ)ELISA試劑盒 | Mouse Fcoagulation factor Ⅸ,FⅨ ELISA試劑盒 |
小鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒 | Mouse coagulation factor Ⅹ,FⅩ ELISA試劑盒 |
大鼠凝血因子Ⅻ(FⅫ)ELISA試劑盒 | Rat coagulation factor Ⅻ,FⅫ ELISA試劑盒 |
大鼠凝血因子ⅩⅢ(FⅩⅢ)ELISA試劑盒 | Rat coagulation factor ⅩⅢ,FⅩⅢ ELISA試劑盒 |
大鼠凝血因子Ⅲ(FⅢ)ELISA試劑盒 | Rat coagulation factor Ⅲ,FⅢ ELISA試劑盒 |
大鼠凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒 | Rat coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA試劑盒 |
大鼠凝血因子Ⅷ相關(guān)抗原(FⅧ-Ag)ELISA試劑盒 | Rat coagulation factor Ⅷ related antigen,FⅧ-Ag ELISA試劑盒 |
大鼠凝血因子IX(FIX)ELISA試劑盒 | Rat Fcoagulation factor Ⅸ,FⅨ ELISA試劑盒Rat Fcoagulation factor Ⅸ,FⅨ ELISA試劑盒 |
大鼠凝血因子Ⅹ(FⅩ)ELISA試劑盒 | Rat coagulation factor Ⅹ,FⅩ ELISA試劑盒 |
兔子凝血因子Ⅱ(FⅡ)ELISA試劑盒 | Rabbit coagulation factor Ⅱ,FⅡ ELISA試劑盒 |
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