水樣中六價(jià)鉻離子（Cr6+）濃度檢測(cè)試劑盒說(shuō)明書(shū)
微量法100T/96S
注 意：正式測(cè)定之前選擇2-3個(gè)預(yù)期差異大的樣本做預(yù)測(cè)定。
測(cè)定意義：
Cr6+主要來(lái)自電鍍、冶煉、表面處理工業(yè)等排放的污水和廢氣。通過(guò)消化道、呼吸道、皮膚及粘膜Cr6+進(jìn)入人體，造成傷害，甚至引起遺傳變異而致癌。
測(cè)定原理：
在酸性環(huán)境中，Cr6+與二苯碳酰二肼作用生成紫紅色絡(luò)合物，在540nm有特征光吸收。
自備儀器和用品：
可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、可調(diào)式移液槍、丙酮和蒸餾水。
試劑組成和配制：
試劑一：液體1.1mL×1管，室溫保存。
試劑二：粉劑×1管，4℃避光保存。臨用前加1.4 mL丙酮充分溶解，顏色變深后不能再用。
標(biāo)準(zhǔn)品：液體1mL×1管，60 nmol/mL Cr6+，室溫保存。
水樣中六價(jià)鉻離子檢測(cè)：
1. 分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀預(yù)熱30min，調(diào)節(jié)波長(zhǎng)到540nm，蒸餾水調(diào)零。
2. 標(biāo)準(zhǔn)管：取微量石英比色皿/96孔板，加入20μL標(biāo)準(zhǔn)液，180μL蒸餾水，混勻；加10μL試劑一，10μL試劑二，充分混勻；室溫下靜置10min，于540nm測(cè)定吸光度，記為A標(biāo)準(zhǔn)管。
3. 水樣測(cè)定：
（1）無(wú)色水樣直接測(cè)定：取微量石英比色皿/96孔板，加入200μL無(wú)色水樣，10μL試劑一，充分混勻；再加入10μL試劑二，充分混勻；室溫下放置10min。于540nm測(cè)定吸光度，記為A測(cè)定管。
（2）有色水樣：取微量石英比色皿/96孔板，加入200μL水樣，10μL試劑一，蓋緊混勻后置于沸水浴中2min，退色；冷卻后加10μL試劑二，充分混勻；室溫下放置10min。于540 nm測(cè)定吸光度，記為A測(cè)定管。
注意：標(biāo)準(zhǔn)管只需測(cè)定一次。
六價(jià)鉻離子濃度計(jì)算：
CCr6+(μmol/L)= C標(biāo)準(zhǔn)管÷標(biāo)準(zhǔn)品稀釋倍數(shù)×(A測(cè)定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管) ×V總
=6000×(A測(cè)定管÷A標(biāo)準(zhǔn)管)
C標(biāo)準(zhǔn)：60nmol/mL=60 μmol/L；標(biāo)準(zhǔn)液稀釋倍數(shù)：（20 μL標(biāo)準(zhǔn)液+180μL蒸餾水）÷20 μL標(biāo)準(zhǔn)液=10； V總：1L=1000 mL
注意事項(xiàng)：
1. 水樣中鐵約50倍于六價(jià)鉻時(shí)，產(chǎn)生黃色，干擾測(cè)定，不宜用本試劑盒進(jìn)行測(cè)定；10倍于鉻的釩可產(chǎn)生干擾，但顯色20min后釩與試劑所顯色全部消失；200mg/L以上的鉬與汞有干擾；
2. 六價(jià)鉻離子為重金屬有毒離子，測(cè)定過(guò)程中應(yīng)注意安全，佩戴口罩和手套，以免吸入或沾到。
3. Z低檢出限為1mmol/L。
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