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Thermo 反相色譜柱 使用和維護(hù)說(shuō)明
1. 適用鍵合相 反相色譜柱鍵合相包括:C18、C8、C4、C1、Phenyl、PFP、aQ 等。
2. 柱體積 色譜柱的柱體積可以通過(guò)以下公式估算: V=0.68 π (d/2)2 L·10-3 V 為色譜柱柱體積(mL),d 為色譜柱內(nèi)徑(mm),L 為色譜 柱長(zhǎng)度(mm)。
3. 色譜柱柱效測(cè)試與保存 反相色譜柱出廠時(shí)都經(jīng)過(guò)柱效測(cè)試,所用化合物為茶堿、鄰二 甲苯、對(duì)硝基苯胺、苯甲酸甲酯和二甲苯,如有不同,以柱效 報(bào)告為準(zhǔn)。 在條件允許情況下,請(qǐng)對(duì)新色譜柱進(jìn)行柱效測(cè)試。 反相色譜柱出廠的保存溶劑詳見(jiàn)柱盒或 COA 報(bào)告。
4. 溫度 所有硅膠基質(zhì)色譜柱使用溫度應(yīng)低于 60℃。
5、 樣品制備 最好將樣品溶解在流動(dòng)相或極性相近的溶劑中。如果使用梯度 洗脫,則需要將樣品溶解在初始流動(dòng)相或極性相近的溶劑中。 樣品溶液不應(yīng)含有任何顆粒物,最好使用 0.45 μm 或更小孔徑 的濾膜過(guò)濾。同時(shí)建議在刪除空格色譜系統(tǒng)中使用在線過(guò)濾器。 樣品溶液如果使用強(qiáng)洗脫溶劑(例如,流動(dòng)相為水,樣品溶劑 為甲醇),為達(dá)到較好峰形,需要降低進(jìn)樣量(以 250×4.6 mm 規(guī)格為例,小于 10 μL)。
6、 流動(dòng)相 所有流動(dòng)相,特別是含有緩沖鹽的流動(dòng)相,最好實(shí)驗(yàn)當(dāng)天配制; 如果使用了早前配制的流動(dòng)相,請(qǐng)確保流動(dòng)相 pH 值是否變化, 并確保流動(dòng)相沒(méi)有發(fā)霉長(zhǎng)菌。 流動(dòng)相的 pH 值取決于您的應(yīng)用和色譜柱填料類型。此說(shuō)明書(shū) 上所列的所有的色譜柱上都建議使用 pH 范圍為 2~8 之間的流 動(dòng)相,如果需要使用 pH 更高(1.5-10)的流動(dòng)相的硅膠柱, 請(qǐng)選用 Acclaim PolarAdvantage II (PA2)、Acclaim AMG C18、 Accucore Polar Premium 等色譜柱,具體使用情況請(qǐng)咨詢工程 師或者參考該柱子的說(shuō)明書(shū)。 如實(shí)驗(yàn)方法中使用高比例的水(>95%)作為流動(dòng)相條件,強(qiáng)烈 建議使用耐水鍵合相,例如 Accucore aQ、Hypersil GOLD aQ、 Aquasil C18、Syncronis aQ 等色譜柱,保證重現(xiàn)性。 所有流動(dòng)相都需使用 0.22 μm 濾膜過(guò)濾。