WesternBlotRapidTransferBuffer(20X)

CatalogNumber：ED510

01/產(chǎn)品概述：

立譜沃生物的WesternBlot快速轉(zhuǎn)膜液(20X)ED510，即WesternBlotRapidTransferBuffer(20X)，是一種20倍濃縮的安全無(wú)毒害的用于WesternBlot實(shí)驗(yàn)的快速濕轉(zhuǎn)緩沖液。本產(chǎn)品采用全新的快速轉(zhuǎn)印配方，15-30min即可高效、快速地將蛋白轉(zhuǎn)移到印跡膜（PVDF或硝纖膜）上。本產(chǎn)品為20倍濃縮(20X)溶液，使用前需要用適當(dāng)水和乙醇稀釋至1X。配制過程中，可用無(wú)水乙醇替代甲醇，無(wú)需使用劇毒的甲醇等試劑，安全無(wú)毒害。轉(zhuǎn)膜全程產(chǎn)熱小，無(wú)需外置冰浴。

02/產(chǎn)品組分

03/保存條件：常溫運(yùn)輸。室溫干燥處保存，有效期12個(gè)月。

04/Western Blot快速轉(zhuǎn)膜液(20X) ED510產(chǎn)品特點(diǎn)

　　1.轉(zhuǎn)印快速、高效——500mA恒流轉(zhuǎn)膜15-20分鐘或400mA恒流轉(zhuǎn)膜約20-30分鐘，即可將聚丙烯酰胺凝膠上的蛋白轉(zhuǎn)移至印跡膜上，轉(zhuǎn)膜效果好。

　　2.無(wú)需外置冰浴，僅使用內(nèi)置冰盒即可——轉(zhuǎn)膜過程產(chǎn)熱非常小，無(wú)需外置冰浴，減少蛋白損失。相同的條件下使用傳統(tǒng)的轉(zhuǎn)膜液更容易導(dǎo)致過度發(fā)熱，而在發(fā)熱程度相似的情況下傳統(tǒng)轉(zhuǎn)膜液需要轉(zhuǎn)膜更長(zhǎng)時(shí)間。

　　3.使用安全——可用無(wú)水乙醇替代甲醇，選擇靈活，可避免使用有毒的甲醇等試劑。

05/適用范圍

　　WesternBlot快速轉(zhuǎn)膜液(20X)適用于WesternBlot濕轉(zhuǎn)法轉(zhuǎn)膜。兼容各種常見凝膠，例如Laemmli膠、預(yù)制膠、FastPAGE、Bis-Tris膠等。

06/使用說明

　　一、WesternBlot快速轉(zhuǎn)膜液(1X)1000mL的配制方法：

　　取WesternBlotRapidTransferBuffer(20X)50mL加入850mL超純水中，加入100mL無(wú)水甲醇（或無(wú)水乙醇），混勻，4℃保存?zhèn)溆谩?/p>

　　二、Western Blot快速轉(zhuǎn)膜液(20X) ED510參考轉(zhuǎn)膜條件：

　　根據(jù)實(shí)驗(yàn)條件及儀器的不同，轉(zhuǎn)膜條件會(huì)有差別。通常條件下，轉(zhuǎn)膜電流可設(shè)置為電泳儀允許的最大電流。具體轉(zhuǎn)膜條件可根據(jù)電泳儀電流限定、凝膠厚度、分離膠濃度、目的蛋白分子量做出適當(dāng)調(diào)整。參考轉(zhuǎn)膜條件如下：

　　1.梯度膠

　　濃度4%~15%，厚度0.75mm，恒流400mA，30min以內(nèi)所有條帶均可完成轉(zhuǎn)膜。

　　2.普通PAGE膠

　　轉(zhuǎn)膜效率與分離膠濃度及厚度有關(guān)，對(duì)于各濃度1.0mm凝膠，采用恒流400mA，按如下時(shí)長(zhǎng)即可將150kDa以下蛋白轉(zhuǎn)印*，若蛋白分子量大于150kDa，需延長(zhǎng)轉(zhuǎn)膜時(shí)間5-10min。

ØPAGE膠厚度越厚，轉(zhuǎn)膜效率越低。對(duì)于厚度1.5mm的凝膠，可將上表推薦的轉(zhuǎn)膜時(shí)間相應(yīng)延長(zhǎng)5-10min。

07/WesternBlot快速轉(zhuǎn)膜液(20X)ED510注意事項(xiàng)

　　1.PVDF膜使用前需用無(wú)水甲醇潤(rùn)濕30秒以上進(jìn)行活化。

　　2.轉(zhuǎn)膜液稀釋為1x后請(qǐng)盡快使用，應(yīng)避免長(zhǎng)時(shí)間存放于室溫，短期內(nèi)保存建議放置于4℃冰箱。

　　3.轉(zhuǎn)膜時(shí)，如果出現(xiàn)報(bào)錯(cuò)而停止，需要根據(jù)情況查看是否是電壓或電流過載、轉(zhuǎn)膜液過多或過少、轉(zhuǎn)膜槽短路或斷路等異常情況。

　　4.回收的轉(zhuǎn)膜液可重復(fù)使用1-2次，但為取得更好的轉(zhuǎn)膜效果，不建議多次重復(fù)使用，以免影響轉(zhuǎn)膜效率。

　　5.為了您的健康安全，請(qǐng)規(guī)范操作，穿戴實(shí)驗(yàn)服與手套開展實(shí)驗(yàn)。

　　6.本產(chǎn)品僅供科研使用，請(qǐng)勿用于臨床診斷及治療。

08/其他相關(guān)產(chǎn)品