熒光顯微鏡用于研究細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)的吸收、運(yùn)輸、化學(xué)物質(zhì)的分布及定位等。細(xì)胞中有些物質(zhì),如葉綠素等,受紫外線照射后可發(fā)熒光;另有一些物質(zhì)本身雖不能發(fā)熒光,但如果用熒光染料或熒光抗體染色后,經(jīng)紫外線照射亦可發(fā)熒光,熒光顯微鏡就是對(duì)這類物質(zhì)進(jìn)行定性和定量研究的工具之一。
熒光顯微鏡是一種較為常用的的光學(xué)顯微鏡,其基本原理是利用一定波長的激發(fā)光對(duì)樣品進(jìn)行激發(fā),使之產(chǎn)生一定波長的熒光,從而用于對(duì)樣品結(jié)構(gòu)或其組分進(jìn)行定性、定位、定量觀察檢測(cè)。采用紫外光線照明的顯微鏡,它要求配置特殊的能提供紫外光的光源和濾光裝置。使用時(shí),紫外光并不直接進(jìn)入觀察者的眼睛,而是激發(fā)標(biāo)本中的熒光物質(zhì)或經(jīng)熒光浸潤染色的標(biāo)本。觀察時(shí)效果與暗場(chǎng)顯微鏡相似,是在黑暗背景中顯現(xiàn)出標(biāo)本明亮的熒光圖像。
熒光顯微鏡檢測(cè)物質(zhì)的能力非常高,并且具有放大作用;被檢測(cè)物質(zhì)對(duì)細(xì)胞的刺激很小,可以檢測(cè)出生物體的染色體。并且可以執(zhí)行多個(gè)步驟。熒光素的結(jié)構(gòu)觀察非常好,普通顯微鏡是不可見的。另外,判斷某些物質(zhì)是否具有熒光,判斷為哪種色調(diào)是熒光,是否觀察到抗體的熒光。該顯微鏡可用于對(duì)物體進(jìn)行定性和定量分析。
一般情況下,單獨(dú)使用熒光顯微鏡即可以達(dá)到我們想要的成像效果,但在某些情況下,比如說當(dāng)熒光比較微弱的情況下,僅僅通過熒光顯微鏡并不能達(dá)到理想的拍攝效果,或者我們希望可以將拍攝的熒光圖片上傳的電腦生面預(yù)覽,修改甚至發(fā)表學(xué)術(shù)論文,這時(shí)候沒有熒光顯微鏡CCD是不能達(dá)到要求的。