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酶標(biāo)板在使用過程中是有幾步需要操作
閱讀：1344 發(fā)布時間：2021-11-3
酶標(biāo)板在酶聯(lián)免疫吸附試驗中, 參與免疫學(xué)反應(yīng)的抗原、抗體、標(biāo)記抗體或抗原的純度、濃度和比例；緩沖液種類、濃度和離子強度、pH值和反應(yīng)溫度、時間等條件起著關(guān)鍵作用。此外,作為載體的固相聚苯乙烯表面對抗原、抗體或抗原抗體復(fù)合物的吸附也起著重要作用。
酶標(biāo)板是酶聯(lián)免疫反應(yīng)實驗中的重要載體工具，分為可拆和不可拆的，一般用的較多的是可拆的酶標(biāo)板。在使用時，按照以下步驟操作：
1、加樣品：將標(biāo)本稀釋液加到包被板內(nèi)，將需要檢測的血清用PBS或生理鹽水按照1：20的比例稀釋后取10ul加入到酶標(biāo)板的反應(yīng)孔內(nèi)。
2、加對照：加入陰性對照3孔，陽性對照1孔，還有100ul的對照血清。
3、進行溫育：將反應(yīng)板震蕩，使樣品充分的混勻，置于37℃的溫箱或者水浴反應(yīng)20分鐘的時間。
4、洗板：用蒸餾水將洗滌液15ml稀釋至300ml的體積。手洗的時候應(yīng)該將反應(yīng)板孔內(nèi)的容物傾出，將洗滌液注滿反應(yīng)孔的位置，然后放置30秒鐘后用力甩去，這樣的動作重復(fù)5次后開始拍干。機洗需要進行5次，每孔注入洗滌液200ul或者可以注滿，然后停留30秒鐘后吸盡拍干。
5、加酶標(biāo)工作液：在每孔內(nèi)加入100ul的酶標(biāo)工作液，放置到37℃的溫箱中，反應(yīng)20分鐘后洗板5次，洗板的操作和上述步驟4是相同的。
6、這是反應(yīng)的最后一步，就是顯色和終止反應(yīng)：將底物50ul加到反應(yīng)孔內(nèi)，37℃條件下避光顯色10分鐘的時間。在每孔內(nèi)加入終止液50ul混勻用以終止反應(yīng)。