簡介:
提到細胞污染,大家想到較多的是細胞中的細菌、渾濁的培養(yǎng)基、培養(yǎng)瓶中的非法入侵者等。此外,病毒和化學污染對細胞培養(yǎng)物的健康也非常重要,確保細胞株不存在交叉污染也是獲得可重復結果的關鍵因素。
控制污染的關鍵是如何檢測出污染。
細菌、真菌和酵母污染物通常是肉眼可見的,或許能迅速殺死細胞,但微妙的形態(tài)可能使重要的微生物入侵者像支原體一樣難以被檢測到。相比之下,傳統(tǒng)光學顯微鏡無法檢測到病毒,因此病毒污染通常是在觀察到無法解釋的分離、細胞健康較差的其他跡象或甚至是細胞死亡時才被發(fā)現(xiàn)的。
總結:
抗生素雖然減少了可以觀察到的細菌、酵母等微生物的污染機會,卻會增加支原體、病毒等隱性污染的機會。
因為細胞培養(yǎng)中污染主要來源于空氣中的微粒和汽霧,而這些微粒和汽霧可以同時攜帶支原體、病毒和其他微生物。當抗生素使用時,可見污染被抑制而隱性污染又沒被注意到,這樣支原體、病毒等隱性污染的機會反而增加了。Barile的一項研究顯示72%持續(xù)使用抗生素培養(yǎng)的細胞有支原體污染,而不使用抗生素培養(yǎng)的細胞支原體污染的比例只有7%
反過來如果不使用抗生素,支原體、病毒的污染往往會伴隨細菌和酵母等的污染。由于細菌和酵母等的污染很容易觀察到,污染細胞的及時清理就大大減少了支原體、病毒的污染機會。
潛在的支原體、病毒的污染會帶來很大的危害。這些微生物的存在會影響細胞的理化性質,從而使研究者得到錯誤的實驗結果。在嚴重的情況下,甚至使一個實驗室數年的研究白白浪費。
由于過濾技術的提高和超凈臺質量的改進,在規(guī)范的細胞培養(yǎng)操作過程中引進污染的機會已經被大大降低了。所以比較合理的建議是,在常規(guī)的細胞培養(yǎng)中不要使用抗生素。只有在培養(yǎng)污染源很多(比如組織培養(yǎng)),或者培養(yǎng)非常珍貴的細胞株時才使用抗生素。
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