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參考價(jià)	面議

細(xì)胞系/細(xì)胞株

鼠源細(xì)胞系

人源細(xì)胞系

應(yīng)用領(lǐng)域	醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè)

小鼠小膠質(zhì)BV2細(xì)胞來源于德國DSMZ（German collection of microorganisms and cell cultures），源于C57BL/6小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞，表達(dá)核v-myc、染色體v-raf癌基因，表面表達(dá)envgp70抗原，在形態(tài)學(xué)、表型及功能上有吞噬細(xì)胞的特征。免疫組化結(jié)果顯示細(xì)胞為MAC1,MAC2陽性，而MAC3，膠質(zhì)細(xì)胞原纖維酸性蛋白，半乳糖腦苷脂為陰性。

詳細(xì)介紹

　　小鼠小膠質(zhì)BV2是一種源自新生C57/BL6小鼠的小膠質(zhì)細(xì)胞，通過感染帶有v-raf/v-myc癌基因的J2逆轉(zhuǎn)錄病毒實(shí)現(xiàn)細(xì)胞永生化。它們?cè)谛螒B(tài)學(xué)、表型及功能上保留了小神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞的特征，并且在神經(jīng)科學(xué)研究中得到了廣泛應(yīng)用，尤其是在模擬神經(jīng)系統(tǒng)疾病和研究相關(guān)疾病機(jī)制方面。

　　具有以下特點(diǎn)：

　　1.形態(tài)：未受刺激的BV2細(xì)胞呈類阿米巴樣的肥大形態(tài)，直徑范圍在10至15μm之間。

　　2.生長特性：半貼壁半懸浮，倍增時(shí)間約為34.5小時(shí)。

　　3.培養(yǎng)條件：在含有10?S的DMEM培養(yǎng)基中，37°C，5%CO2的條件下生長。

　　4.優(yōu)點(diǎn)：具有原代小膠質(zhì)細(xì)胞的特征，如表達(dá)F4/80、CD11b和Iba1等關(guān)鍵生物標(biāo)志物，且為永生化細(xì)胞，適合長期培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)。

　　5.局限性：由于源自小鼠，其研究結(jié)果在人類疾病研究中的適用性可能有限，且作為體外模型可能無法復(fù)制體內(nèi)大腦中小膠質(zhì)細(xì)胞的特征和復(fù)雜性。

　　在神經(jīng)退行性疾病研究中的應(yīng)用包括：

　　1.作為研究帕金森病、阿爾茨海默病和多發(fā)性硬化癥等疾病的模型。

　　2.用于研究神經(jīng)毒性和疾病病理學(xué)，評(píng)估治療藥物的效果。

　　在培養(yǎng)BV2細(xì)胞時(shí)，需要注意：

　　1.傳代時(shí)，由于BV2細(xì)胞是半貼壁半懸浮的，需要單獨(dú)收集懸浮和貼壁部分的細(xì)胞進(jìn)行處理。

　　2.凍存時(shí)，推薦使用55%基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40?S+5%DMSO的凍存液，凍存密度為2~3×10^6 cells/mL。

小鼠小膠質(zhì)BV2細(xì)胞 BV2【BV-2】
l 細(xì)胞鑒定	種屬鑒定已通過
l 細(xì)胞來源	國家資源庫
l 細(xì)胞背景	該細(xì)胞來源于德國DSMZ（German collection of microorganisms and cell cultures），源于C57BL/6小鼠小膠質(zhì)細(xì)胞，表達(dá)核v-myc、染色體v-raf癌基因，表面表達(dá)envgp70抗原，在形態(tài)學(xué)、表型及功能上有吞噬細(xì)胞的特征。免疫組化結(jié)果顯示細(xì)胞為MAC1,MAC2陽性，而MAC3，膠質(zhì)細(xì)胞原纖維酸性蛋白，半乳糖腦苷脂為陰性。
l 細(xì)胞特性	1）來源：小鼠腦 2）形態(tài)：上皮細(xì)胞樣松散貼壁，懸浮和貼壁細(xì)胞混合生長 3）含量：>1x106 細(xì)胞數(shù) 4）規(guī)格：T25瓶或者1mL凍存管包裝 5) 用途：僅供科研使用。
l 培養(yǎng)條件：	1）準(zhǔn)備 DMEM 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 (推薦：awcell-0001) 87% 優(yōu)質(zhì)胎牛血清 10% GlutaMAX-1谷氨酰胺 (推薦：awcell-0900 ) 1% HEPES 1M Buffer solution (推薦：awcell-01200) 1% P/S青霉素-鏈霉素 1%. 2）培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。溫度：37攝氏度。
l 注意事項(xiàng)：	小鼠小膠質(zhì)BV2細(xì)胞該細(xì)胞為懸浮和輕微的貼壁細(xì)胞，傳代可以參考以下方法： 1. 收集：將培養(yǎng)瓶中的懸浮的細(xì)胞收集到離心管中。用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。由于細(xì)胞貼壁不牢PBS潤洗后細(xì)胞會(huì)脫落所以PBS也要回收到離心管中。 2. 加入0.25％（w / v）胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘（難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長消化時(shí)間），然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10?S的培養(yǎng)基來終止消化。 3. 將收集到的懸浮細(xì)胞、pbs清洗液中的細(xì)胞和消化下來的貼壁細(xì)胞以1000rpml離心5min，棄去上清，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后重懸混勻后將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長活力，后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。 3）細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。
l 運(yùn)輸形式：	低溫：（1）1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸，收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇，若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染，請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。常溫（2） T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨，收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。
l 生物安全：	1. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作，并請(qǐng)注意防護(hù)，所有廢液及接觸過此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。 2. 建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩。注意：凍存管浸沒在液氮中會(huì)泄漏，并會(huì)慢慢充滿液氮。解凍時(shí)，液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險(xiǎn)力吹掉其蓋子，從而產(chǎn)生飛揚(yáng)的碎屑造成人員傷害。