目錄:上海安為生物科技有限公司>>細(xì)胞系/細(xì)胞株>>人源細(xì)胞系>> Bend3小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞株 Bend.3
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更新時(shí)間:2024-08-21 11:13:19瀏覽次數(shù):1200評(píng)價(jià)
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應(yīng)用領(lǐng)域 | 醫(yī)療衛(wèi)生,生物產(chǎn)業(yè) |
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Bend.3 小鼠腦微血管內(nèi)皮細(xì)胞株
Bend.3【Bend3】 | |
l 細(xì)胞鑒定 | 種屬鑒定已通過(guò) |
l 細(xì)胞來(lái)源 | 國(guó)家資源庫(kù) |
l 細(xì)胞背景 | 細(xì)胞轉(zhuǎn)染了表達(dá)多瘤病毒中T抗原的NTKmT逆轉(zhuǎn)錄病毒載體。觀察到血管性血友病因子的表達(dá)及對(duì)熒光標(biāo)記的低密度脂蛋白(LDL)的攝入確認(rèn)其內(nèi)皮細(xì)胞特性。bEnd.3 cells細(xì)胞可用細(xì)胞因子和脂多糖(LPS)誘導(dǎo)淋巴細(xì)胞的Peyer's結(jié)高內(nèi)皮細(xì)胞受體,粘膜血管定居因子(MAdCAM-1) 及內(nèi)皮細(xì)胞選擇素的表達(dá)。腫瘤壞死因子 a (TNF alpha), 白介素 1 (IL-1)或 LPS的誘導(dǎo)作用是濃度及時(shí)間依賴的。代數(shù)較早的bEnd.3細(xì)胞未受刺激時(shí)在表面表達(dá)MAdCAM-1,但過(guò)了30代后就不表達(dá)了。細(xì)胞粘附分子 1 (ICAM-1)持續(xù)表達(dá),并在LPS, IL-1 and TNF a處理后升高。30代前血管細(xì)胞粘附分子1 (VCAM-1)持續(xù)表達(dá),但30代后不表達(dá)。 bEnd.3細(xì)胞中腫瘤壞死因子a (TNF alpha)可以誘導(dǎo)P-選擇素的表達(dá),30代后更強(qiáng)。 |
l 細(xì)胞特性
| 1) 來(lái)源:BALB/c小鼠腦 2) 形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣 貼壁生長(zhǎng) 3) 含量:>1x106 細(xì)胞數(shù) 4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝 5) 用途:僅供科研使用。 |
l 培養(yǎng)條件: | 1) 準(zhǔn)備DMEM ( 推薦awcell-128-0001含NaHCO3 1.5g/L;GIBCO,貨號(hào)12800017,添加NaHCO3 1.5g/L) 培養(yǎng)基,優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%,雙抗 1%。 2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。 |
l 注意事項(xiàng):
| 注意:(bEnd.3細(xì)胞對(duì)培養(yǎng)基pH值的任何不平衡都很敏感。使用配方含有3.7 g / L碳酸氫鈉的DMEM培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)為穩(wěn)定培養(yǎng)基PH值,增加CO2是必要的,否則這些細(xì)胞不會(huì)很好地附著或增殖,細(xì)胞建議在空氣,90%、二氧化碳,10%環(huán)境中培養(yǎng)。經(jīng)驗(yàn)證在空氣,95%;二氧化碳,5%的環(huán)境下使用含1.5 g / L碳酸氫鈉的DMEM培養(yǎng)基會(huì)比較好,推薦使用含1.5 g / L碳酸氫鈉的DMEM培養(yǎng)基+優(yōu)質(zhì)胎牛血清10%來(lái)培養(yǎng)。 對(duì)于貼壁細(xì)胞傳代可以參考以下方法: 1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。 2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細(xì)胞可以適當(dāng)延長(zhǎng)消化時(shí)間),然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來(lái)終止消化。 3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說(shuō)明書(shū)要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細(xì)胞的生長(zhǎng)活力,后續(xù)傳代根據(jù)實(shí)際情況按1:2~1:5的比例進(jìn)行。 3)細(xì)胞凍存: 收到細(xì)胞后建議在培養(yǎng)前3代時(shí)凍存一批細(xì)胞種子以備后續(xù)實(shí)驗(yàn)使用。 |
l 運(yùn)輸形式: | 低溫:(1)1mL凍存管包裝干冰運(yùn)輸,收到后-80度冰箱保存過(guò)夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復(fù)蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細(xì)胞有污染,請(qǐng)立即與我們聯(lián)系。 常溫(2) T25瓶復(fù)蘇的存活細(xì)胞常溫發(fā)貨,收到后按照細(xì)胞接收后的處理方法操作。 |
l 生物安全: | 1. 所有動(dòng)物細(xì)胞均視為有潛在的生物危害性,必須在二級(jí)生物安全臺(tái)內(nèi)操作,并請(qǐng)注意防護(hù),所有廢液及接觸過(guò)此細(xì)胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。 2. 建議在復(fù)蘇凍存細(xì)胞時(shí)始終使用防護(hù)手套、衣服和戴上防護(hù)面罩。注意:凍存管浸沒(méi)在液氮中會(huì)泄漏,并會(huì)慢慢充滿液氮。解凍時(shí),液氮轉(zhuǎn)化成氣相可能導(dǎo)致容器爆炸或用危險(xiǎn)力吹掉其蓋子,從而產(chǎn)生飛揚(yáng)的碎屑造成人員傷害。 |
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