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　　各類細(xì)胞產(chǎn)品是我們做實(shí)驗(yàn)研究的基礎(chǔ)，一支小小的細(xì)胞，關(guān)乎我們各種實(shí)驗(yàn)的成功與否，細(xì)胞的”小事情“，在實(shí)驗(yàn)中都是”大事情“，如果你的細(xì)胞出現(xiàn)生長緩慢、不貼壁等情況，那你可要注意了，這就是細(xì)胞狀態(tài)不好的信號(hào)，要及時(shí)“挽救”，不然很有可能細(xì)胞就瀕臨死亡。

　　問題一：細(xì)胞生長緩慢

　　細(xì)胞長得慢是細(xì)胞培養(yǎng)過程中比較常見的問題，一般來說，細(xì)胞活力和濃度一直是細(xì)胞健康的標(biāo)志，細(xì)胞長得慢的話，活力和濃度可能都會(huì)直線下降。

　　造成細(xì)胞生長緩慢的主要原因及解決方法：

　　1，新配置的培養(yǎng)基以及換了新的血清，細(xì)胞不適應(yīng);

　　解決方法：最好使用最適宜的培養(yǎng)基，如果條件不允許，可以換液時(shí)不要全量換液逐漸增加新的培養(yǎng)基比例，1/4、1/2、3/4到1，多傳代幾次，讓細(xì)胞慢慢適應(yīng)。

　　2，細(xì)胞密度不夠

　　有些細(xì)胞是細(xì)胞依賴性細(xì)胞，密度過低生長緩慢;也可能是細(xì)胞分泌促生長活性物質(zhì)過少，細(xì)胞連接不好等原因。

　　解決辦法：增加細(xì)胞接種密度;將細(xì)胞從大皿轉(zhuǎn)移至小皿培養(yǎng);適當(dāng)增加培養(yǎng)基血清濃度。

　　3，培養(yǎng)環(huán)境改變

　　細(xì)胞培養(yǎng)箱的溫度、CO2、細(xì)胞的生存環(huán)境要適宜，一般來說最佳溫度:是37 ℃， CO2:濃度為5% ， pH:為7.2-7.4，還有滲透壓等，大家要注意調(diào)好，不要隨意改變。

　　4，污染，如支原體，細(xì)菌，真菌等

　　解決辦法：細(xì)胞污染是多方面的原因，一方面要嚴(yán)格無菌操作技術(shù)、保持清潔的環(huán)境，另一方面，污染之后要及時(shí)鑒別和處理，并且，建議大家使用品質(zhì)良好的細(xì)胞株和培養(yǎng)基，這是是減少污染的最好方法。

　　5，細(xì)胞本身狀態(tài)改變，如衰老等

　　解決辦法：沒有可逆的辦法，只能及時(shí)更換新的細(xì)胞。

　　當(dāng)然如果培養(yǎng)細(xì)胞是原代的話，生長速度是比較緩慢的，如果沒有及時(shí)換液，營養(yǎng)成分不夠，細(xì)胞也會(huì)生長緩慢。用螺旋口瓶培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，需將瓶蓋微松，以保證通氣，要保持培養(yǎng)箱內(nèi)空氣干凈等。

　　其實(shí)只要條件適于細(xì)胞生長，細(xì)胞在自己的“小房子”里面舒適自由，那么，它一定會(huì)長得很快，并且，形態(tài)越來越“漂亮”。

　　問題二：細(xì)胞不貼壁

　　一般來說，正常情況下，細(xì)胞培養(yǎng)一段時(shí)間后，正常生長的小細(xì)胞們貼在壁上，優(yōu)哉游哉地享受生活，而沒能存活的細(xì)胞和其他種類的細(xì)胞則可能懸浮在上，如果你的細(xì)胞不貼壁，極有可能是沒有存活下來。

　　細(xì)胞不貼壁可能原因及解決辦法：

　　1，胰酶消化過度；解決方法：適當(dāng)縮短胰酶消化時(shí)間或降低胰酶濃度。

　　2，支原體污染；解決方法：分離培養(yǎng)物，檢測支原體。清潔支架和培養(yǎng)箱。如發(fā)現(xiàn)支原體污染，丟棄培養(yǎng)物。

　　3，培養(yǎng)瓶瓶底不干凈；解決方法：換用新的培養(yǎng)皿或者培養(yǎng)瓶。

　　4，消化液或培養(yǎng)液配制錯(cuò)誤、過期儲(chǔ)存、儲(chǔ)存不當(dāng)；解決方法：重新配置消化液或培養(yǎng)液

　　5，細(xì)胞老化；解決方法：同樣，沒有可逆的辦法，只能及時(shí)更換新的細(xì)胞。

　　6，接種細(xì)胞起始濃度太低或太高；解決方法：根據(jù)細(xì)胞特性接種適量的細(xì)胞。

　　總之，養(yǎng)細(xì)胞需要耐心，要溫柔，要不然她真的會(huì)給你顏色看哦。上文也提到了，使用品質(zhì)良好的細(xì)胞株和培養(yǎng)基是減少污染的最好方法，同時(shí)也是保證細(xì)胞生長良好的前提。

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