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貨物所在地：湖北武漢市
所在地： 武漢東湖高新區(qū)高新大道858號
更新時間：2024-05-14 21:00:05
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一、細胞基本屬性
細胞名稱：K562（人慢性髓原白血病細胞）
細胞別稱：K562; K 562; GM05372; K-562[K562]
細胞貨號：SNL-042
細胞種屬：人
生長情況：懸浮
培養(yǎng)條件：IMDM+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境：air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細胞培養(yǎng)操作
換液周期：2-3天
培養(yǎng)基體積：T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml
傳代比例：1:2-1:4（具體情況視細胞生長速度及密度決定）
傳代方法：
1.混勻細胞，收集細胞培養(yǎng)基，900rpm離心3-5min，棄上清；
2.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里；
3.補足*培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；
注意事項：部分懸浮細胞會附著瓶底，輕輕晃動培養(yǎng)基或者吹打細胞面就會脫落，不需要胰酶消化。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng)，更適合吹打細胞操作，吹打細胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。
三、細胞凍存操作
凍存液配方：92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格：200-300萬/ml，1ml每管
凍存方法：
1. 離心獲得細胞沉淀后，加配置好的凍存液輕輕重懸細胞；
2. 將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管；
3. 將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒，放入-80度冰箱過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存；沒有程序凍存盒的實驗室，加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項：凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性，若有異常，及時調(diào)整實驗方案
Tips：
1.細胞懸浮圓形生長，偶有小聚團，大量細胞圓形附著瓶底；
2.圓形透亮、細胞膜完整的細胞是活細胞，如果無法判斷，可以取少量細胞用臺盼藍染色后計數(shù)確定細胞活率；
3.懸浮細胞密度維持1E5-5E5/ml之間，密度過低或者過高可能會影響細胞狀態(tài)；
我們推薦使用尚恩生物K562（人慢性髓原白血病細胞）*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：SNLM-042）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
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