| 供貨周期 |
現貨 |
規(guī)格 |
50T/100T |
| 貨號 |
26227 |
應用領域 |
化工,生物產業(yè) |
本試劑盒先用溶菌酶處理,再用堿裂解法裂解細胞,通過吸附柱在高鹽狀態(tài)下特異性地結合溶液中的DNA的特性提取質粒DNA
規(guī)格參數：
英文名稱:Gram-positiveBacteriumPlasmidExtractionMaxiKit
儲存條件:酶附件-20℃，其它試劑RT，復檢期1年
單位:盒
規(guī)格:10T
本試劑盒先用溶菌酶處理,再用堿裂解法裂解細胞,通過吸附柱在高鹽狀態(tài)下特異性地結合溶液中的DNA的特性提取質粒DNA。吸附柱中采用的硅基質材料能高效、專一地吸附DNA,可大限度去除雜質蛋白質及細胞中其他有機化合物。從1-5ml培養(yǎng)液中,可快速提取5-15μg純凈地高拷貝質粒DNA,提取率達85-90%。使用本試劑盒提取的質粒DNA可適用于各種常規(guī)的分子生物學試驗,包括酶切、PCR、測序、連接和轉化等試驗。本試劑盒無需使用酚、氯仿等有毒試劑,操作安全。
注意事項:
1、溶液Ⅰ在使用前先加入RNaseA(將試劑盒中提供的RNaseA全部加入),混勻,置于2-8℃保存。
2、第一次使用前應按照試劑瓶標簽的說明在漂洗液中加入無水乙醇配制成工作液(向15ml的漂洗液中加入60ml的無水乙醇)。
3、使用前請先檢查溶液Ⅱ和溶液Ⅲ是否出現混濁,如有混濁現象,可在37℃水浴中加熱幾分鐘,待溶液恢復澄清后再使用。
4、溶液Ⅱ、溶液Ⅲ和漂洗液使用后應立即蓋緊蓋子,如非指明,所有離心步驟均為使用臺式離心機室溫下進行離心。
5、如果是提取革蘭氏陽性菌質粒,必須在裂解細胞前破細胞壁,方法如下:收集適量菌體,加入250ul溶液Ⅰ充分懸浮菌體,加入溶菌酶至終濃度為10-20mg/ml,37℃處理30min左右。加入溶菌酶的濃度和處理時間可根據不同的菌株和具體試驗條件進行調整。
6、洗脫緩沖液的體積好不少于50ul,體積過小會影響回收效率;洗脫液的pH值對洗脫效率也有影響,若需要用水做洗脫液應保證其pH值在8.0左右(可用NaOH將水的pH值調至此范圍),pH值低于7.0會降低洗脫效率。
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