牛血清白蛋白(BSA),是牛血清中的一種球蛋白,主要成分包括蛋白質(zhì)、多肽和激素。
1.蛋白質(zhì):是牛血清中主要成份。除包括可攜帶金屬離子、脂肪酸和自身是激素類蛋白外主要還有白蛋白,球蛋白。
2.多肽:血小板促生長(zhǎng)因子能促細(xì)胞分裂,是多肽家庭的主要成員之一,是主要的促細(xì)胞增殖因子;成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、表皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子、神經(jīng)細(xì)胞生長(zhǎng)因子等,血清中含量雖很少,但對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)也有一定作用。
3.激素對(duì)細(xì)胞的作用是多方面的:胰島素、類胰島素生長(zhǎng)因子、促生長(zhǎng)激素。
4.其他成份:氨基酸、葡萄糖、酮酸等對(duì)多種營(yíng)養(yǎng)成分的合成培養(yǎng)基意義不大。與蛋白相結(jié)合狀態(tài)的微量元素對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)有意義。
成分結(jié)構(gòu):
牛血清中的簡(jiǎn)單蛋白,是血液的主要成分(38g/1000ml),分子量68kD。牛血清白蛋白(BSA),又稱第五組分,是牛血清中的一種球蛋白,包含583個(gè)氨基酸殘基,分子量為66.430 Da,等電點(diǎn)為4.7。牛血清白蛋白在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用,例如在western blot中作為Blocking agent。
作用:
BSA一般做為穩(wěn)定劑被用于限制酶或者修飾酶的保存溶液和反應(yīng)液中,因?yàn)橛行┟冈诘蜐舛认虏环€(wěn)定或活性低。加入BSA后,它可能起到“保護(hù)"或“載體"作用,不少酶類添加 BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不會(huì)受到什么影響。對(duì)多數(shù)底物DNA而言,BSA可以使酶切更*,并可實(shí)現(xiàn)重復(fù)切割。在37℃,酶切反應(yīng)超過(guò)1h時(shí),BSA可以使酶更加穩(wěn)定,因?yàn)樵诓缓珺SA的反應(yīng)緩沖液中,許多限制性內(nèi)切酶在37℃下只能存活10"20min甚至更短的時(shí)間。而BSA可以結(jié)合緩沖液或底物DNA中抑制限制性內(nèi)切酶活性的金屬離子和其它化學(xué)物質(zhì)。
用途:
1、用于生化研究、遺傳工程和醫(yī)藥研究
2、用作醫(yī)藥保健食品、調(diào)味品
3、維持滲透壓、pH緩沖、載體作用
4、在PCR體系中有助于Taq酶的穩(wěn)定性及活性,可以提高PCR的效率
應(yīng)用:
Fitzgerald牛血清白蛋白(BSA)在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用, 例如在WB實(shí)驗(yàn)中加入BSA, 通過(guò)提高溶液中蛋白質(zhì)的濃度,對(duì)酶起保護(hù)作用。防止酶的分解和非特異性吸附,能減輕有些酶的變性,減輕不利環(huán)境因素如加熱,表面張力及化學(xué)因素引起的變性的。