微生物鑒定藥敏分析儀原理
微生物鑒定藥敏分析儀原理
各種病原菌主要是真菌、腸球菌屬、革蘭氏陽(yáng)性菌及革蘭氏陰性菌等可以通過(guò)微生物鑒定和藥敏分析儀器鑒定出來(lái),而且該儀器還能夠同時(shí)做抗菌藥物敏感性試驗(yàn)從而對(duì)臨床醫(yī)生作出正確的病原學(xué)診斷并制定治療方法有所幫助。
全自動(dòng)微生物鑒定和藥敏分析類儀器與自動(dòng)化、微機(jī)化以及*的微生物檢驗(yàn)方法相結(jié)合,能夠同時(shí)做細(xì)菌鑒定和藥敏試驗(yàn),可以在臨床上對(duì)大多數(shù)細(xì)菌進(jìn)行快速鑒定和藥敏實(shí)驗(yàn)。
細(xì)菌鑒定原理:
使用傳統(tǒng)的比色法和快速熒光法。不同的測(cè)試卡是以不同類別細(xì)菌的理化性質(zhì)不同為依據(jù)設(shè)計(jì)的,每一張卡包含多項(xiàng)生化反應(yīng)。因?yàn)榧?xì)菌生長(zhǎng)利用底物而引起的透光度變化或者細(xì)菌因分解底物造成PH值改變都能夠使用儀器通過(guò)光電比色法來(lái)進(jìn)行測(cè)定。在測(cè)試卡的小孔中加入酶底物,讓它和細(xì)菌產(chǎn)生的酶相結(jié)合,這就是熒光法。儀器可以在較短的時(shí)間內(nèi)對(duì)細(xì)菌結(jié)合不同生化底物所產(chǎn)生的發(fā)熒光的物質(zhì)進(jìn)行分析,細(xì)菌胞外酶是由讀數(shù)器測(cè)定熒光強(qiáng)度來(lái)判定。使用熒光技術(shù)鑒定細(xì)菌的速度能夠提高4- 8倍。兩個(gè)小時(shí)以內(nèi)能夠得出鑒定報(bào)告。細(xì)菌鑒定有多種不同類型的實(shí)驗(yàn)底物。使用的測(cè)試卡和試劑與使用的儀器的品牌是互相對(duì)應(yīng)的。顯色底物和熒光底物都屬于以酶為基礎(chǔ)的反應(yīng)底物。糖類底物和化合物底物都屬于以微生物生長(zhǎng)為基礎(chǔ)的底物。糖類底物和化合物底物,還有混合底物屬于以微生物生長(zhǎng)為基礎(chǔ)的底物其這些底物由于與各種細(xì)菌發(fā)生氧化、降解及水解反應(yīng),產(chǎn)生熒光物質(zhì)或者顏色的變化,細(xì)菌的菌型通過(guò)顯色和熒光強(qiáng)度的變化來(lái)鑒定。儀器會(huì)自動(dòng)選擇底物進(jìn)行分析。
藥敏試驗(yàn)方法:
藥敏試驗(yàn)有比濁法和熒光測(cè)定法兩種測(cè)定方法。以藥敏試驗(yàn)的判讀標(biāo)準(zhǔn)為依據(jù)。 每一種藥物設(shè)計(jì)了多個(gè)稀釋梯度,每一種抗生素可以用3- 8個(gè)測(cè)試孔來(lái)對(duì)Zdi抑菌濃度進(jìn)行測(cè)定,將一定濃度的菌懸液加入到孔中。為了方便對(duì)不同細(xì)菌配置菌懸液的濃度進(jìn)行測(cè)定,系統(tǒng)配有專用光電比濁儀??變?nèi)微生物生長(zhǎng)形成的小顆?;蚓奂傻膱F(tuán)塊會(huì)導(dǎo)致濁度變化,各個(gè)測(cè)試孔的濁度變化是由儀器采用光電比濁法進(jìn)行測(cè)定,每隔一定時(shí)間讀取數(shù)據(jù)一次,讀數(shù)器測(cè)得的吸光度值會(huì)有差異,從而使得待檢菌在不同濃度藥液及不同藥物中的生長(zhǎng)率能夠被獲取。在含有各種濃度的抗生素的反應(yīng)卡中,加入待測(cè)細(xì)菌的菌懸液,經(jīng)過(guò)一定時(shí)間孵育后使用光電比濁法對(duì)其透光率進(jìn)行測(cè)定,獲取其吸光度值,如果細(xì)菌生長(zhǎng),濁度就會(huì)增加,吸光度值就會(huì)增大,說(shuō)明細(xì)菌不會(huì)被該孔內(nèi)的抗生素所抑制,相反就表明該孔內(nèi)的抗生素能夠抑制細(xì)菌,該種抗生素對(duì)此菌的MIC值是指用Z小的藥物濃度依然可以對(duì)細(xì)菌的反應(yīng)孔進(jìn)行抑制。使用熒光技術(shù)測(cè)定時(shí),將熒光底物加入到肉湯中,大多數(shù)菌種的MIC值均可以在5小時(shí)內(nèi)判讀出來(lái)并且能夠依據(jù)相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)報(bào)告其藥物敏感結(jié)果( S、I、R) 。MIC卡每種藥物都有多個(gè)稀釋度,儀器在每讀取一次數(shù)值后會(huì)自動(dòng)比較所測(cè)取的數(shù)據(jù)與存儲(chǔ)在硬盤(pán)中的菌種資料庫(kù)標(biāo)準(zhǔn)菌生物模型,然后經(jīng)過(guò)電腦分析得出鑒定的結(jié)構(gòu),報(bào)告能夠通過(guò)打印機(jī)打印出來(lái)。微生物鑒定藥敏分析儀原理
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