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詳細(xì)介紹
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
心臟 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X8457 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔心臟微血管周分離自心臟組織；心臟是脊椎動(dòng)物身體中重要的一個(gè)器官，主要功能是為血液流動(dòng)提供壓力，把血液運(yùn)行至身體各個(gè)部分。心臟由心肌構(gòu)成，左心房、左心室、右心房、右心室四個(gè)腔組成。左右心房之間和左右心室之間均由間隔隔開(kāi)，故互不相通，心房與心室之間有瓣膜（房室瓣），這些瓣膜使血液只能由心房流入心室，而不能倒流。心臟的作用是推動(dòng)血液流動(dòng)，向器官、組織提供充足的血流量，以氧和各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，并帶走代謝的終產(chǎn)物（如二氧化碳、無(wú)機(jī)鹽、尿素和尿酸等），使細(xì)胞維持正常的代謝和功能。心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞是組成心臟微血管腔面單層扁平上皮樣細(xì)胞，它所產(chǎn)生和分泌的生物活性物質(zhì)對(duì)維持血管張力、調(diào)節(jié)血壓、抗血栓形成等有重要作用，在心臟血管疾病的發(fā)病機(jī)制中有重要病理生理學(xué)意義。近年來(lái)大量研究表明，心肌微血管周細(xì)胞的功能和病理改變直接影響心肌細(xì)胞功能，也是諸多毒素、炎癥因子及病毒等重要靶位，其作為體外研究的細(xì)胞模型在心肌缺血-再灌注發(fā)病機(jī)制和細(xì)胞間旁分泌細(xì)胞生長(zhǎng)因子研究中起著重要作用。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔心臟微血管周采用膠原酶消化法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔心臟微血管周經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件：PLL（0.1mg/ml）
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3-5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔心臟微血管周體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶試劑盒 小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶試劑盒 小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶試劑盒，，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶試劑盒、小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶試劑盒
小鼠血管緊張素原試劑盒 小鼠血管緊張素原試劑盒 小鼠血管緊張素原試劑盒，，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠血管緊張素原試劑盒、小鼠血管緊張素原試劑盒
小鼠血管緊張素試劑盒 小鼠血管緊張素試劑盒 小鼠血管緊張素試劑盒，，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠血管緊張素試劑盒、小鼠血管緊張素試劑盒
小鼠血管活性腸肽試劑盒 小鼠血管活性腸肽試劑盒 小鼠血管活性腸肽試劑盒，，來(lái)源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：小鼠血管活性腸肽試劑盒、小鼠血管活性腸肽試劑盒
AF647標(biāo)記的轉(zhuǎn)錄因子Pax6抗體
氨基丁酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白VGAT抗體
BSG重組小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
CCR-1(CC chemokine receptor 1 0.5mgCCR-1(CC chemokine receptor 1) 細(xì)胞表面趨化因子受體1抗原
PTPMT1重組人 PTPMT1 蛋白 Protein
CD93 Protein Human 重組人 CD93 / C1QR1 蛋白
CD63 Protein Rat 重組大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspan僀?僀
CCR-1(CC chemokine receptor 1 0.5mgCCR-1(CC chemokine receptor 1) 細(xì)胞表面趨化因子受體1抗原
CD93 Protein Human 重組人 CD93 / C1QR1 蛋白
BSG重組小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
CD63 Protein Rat 重組大鼠 CD63 / Tspan-30 / Tetraspanin-30 蛋白
PTPMT1重組人 PTPMT1 蛋白 Protein
小鼠纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒
Rat glamic acid decarboxylase aoaibody (GAD-Ab) ELISA Kit 大鼠谷脫羧酶自身抗體(GAD-Ab)試劑盒
Humanβ-lipoopichormone,β-LPHELISAKit 人β-促脂素(β-LPH)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
ChickenGlucagon,GC試劑盒雞胰高血糖素(GC)試劑盒規(guī)格：96T/48T
載玻片細(xì)胞CASPASE-7蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mousehemeoxygenase2,HO-2ELISAKit小鼠血紅素氧合酶2(HO-2)試劑盒規(guī)格：96T/48T
兔心臟微血管周細(xì)胞大鼠蛋白激酶G(PKG)試劑盒 ，英文名： PKG ELISA Kit
Pig angiopoietin 2 (ANG-2) ELISA Kit 豬血管生成素2(ANG-2)試劑盒
病毒H5亞型核酸試劑盒(熒光PCR法) 48T
CLIAKitforLPS(HumanLipopolysaccharides)ELISAKit人脂多糖/內(nèi)毒素
通用免疫化學(xué)固著溶液10毫升
ELISAKitPPP雞蛋卵黃高0蛋酸肽
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行
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