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          兔胰腺上皮細(xì)胞

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          • 兔胰腺上皮細(xì)胞

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            上海市

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          更新時間:2024-11-05 16:15:16瀏覽次數(shù):574

          聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 5×105cells/T25
          貨號 YS-01X8472 主要用途 僅供科研研究實驗
          兔胰腺上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:人胃癌細(xì)胞-LUC-EGFP;HGC27-LUC-EGFP-PURO K1826蛋白抗體 人宮頸癌組織源細(xì)胞 磷酸化丁酸鹽反應(yīng)因子1抗體 大鼠小腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞 免疫球蛋白超家族成員10抗體 人食管平滑肌細(xì)胞 NDUFB11蛋白抗體

          詳細(xì)介紹

          兔胰腺上皮細(xì)胞

          兔胰腺上皮細(xì)胞

          商品屬性:

          組織來源

          產(chǎn)品規(guī)格

          細(xì)胞形態(tài)

          貨號

          胰腺

          5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

          上皮細(xì)胞樣

          YS-01X8472

          細(xì)胞簡介:

          兔胰腺上皮分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶。胰液通過胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團──胰島所組成,胰島主要由4種細(xì)胞組成:α細(xì)胞、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細(xì)胞分泌胰島素,降低血糖;γ細(xì)胞分泌,以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌;PP細(xì)胞分泌胰多肽,抑制胃腸運動、胰液分泌和膽囊收縮。胰腺干細(xì)胞在發(fā)育上被認(rèn)為分離自內(nèi)胚層胰腺上皮,在隨后的胰腺發(fā)育過程中,胰腺干細(xì)胞分化為胰島細(xì)胞(α、β、δ、PP細(xì)胞)、導(dǎo)管上皮細(xì)胞以及腺泡細(xì)胞。胰腺組織中還存在大量的間充質(zhì)來源的細(xì)胞,包括成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、血管平滑肌細(xì)胞以及星形細(xì)胞,其中以成纖維細(xì)胞占主要部分。要離體分離培養(yǎng)獲得胰腺上皮細(xì)胞就要排除間充質(zhì)來源的細(xì)胞,尤其是成纖維細(xì)胞。目前常用的去除成纖維細(xì)胞方法有機械刮除法、消化以及膠原酶消化法等,胰腺上皮細(xì)胞的病變與急慢性胰腺炎的發(fā)生具有重大意義。

          方法簡介:

          實驗室分離的兔胰腺上皮采用膠原酶分次消化法并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

          質(zhì)量檢測:

          實驗室分離的兔胰腺上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

          培養(yǎng)信息:

          包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

          培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

          換液頻率:每2-3天換液一次

          生長特性:貼壁

          細(xì)胞形態(tài):上皮細(xì)胞樣

          傳代特性:可傳1-2

          消化液:0.25%

          培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%

          兔胰腺上皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。

          兔胰腺上皮細(xì)胞

          細(xì)胞傳代及凍存:

          細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
          如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

          原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

            ① 組織塊培養(yǎng)法

            組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

           ?、?消化培養(yǎng)法

            ③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

            對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

            ④器官培養(yǎng)

            器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

          兔胰腺上皮細(xì)胞


          公司正在出售的產(chǎn)品:

          兔抗腦組織抗體(ABAb)ELISAKit   ELISA

          p53(p53)ELISAKit   ELISA

          Bcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISAKit   ELISA

          (ADR)ELISAKit   ELISA

          B7-H4抗體

          輔酶Q10B抗體

          CLEC6A重組小鼠 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 蛋白 Protein

          CD3 epsilon peptide CD3 epsilon(抗原 0.5mgCD3 epsilon peptide CD3 epsilon(抗原)

          CCDC134重組人 CCDC134 蛋白 Protein

          HNMT Protein Human 重組人 HNMT / Histamine N-methyltransferase 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

          CD14 Protein Rat 重組大鼠 CD14 蛋僀

          CD3 epsilon peptide CD3 epsilon(抗原 0.5mgCD3 epsilon peptide CD3 epsilon(抗原)

          HNMT Protein Human 重組人 HNMT / Histamine N-methyltransferase 蛋白 (GST 標(biāo)簽)

          CLEC6A重組小鼠 CLEC4N / CLEC6A / Dectin-2 蛋白 Protein

          CD14 Protein Rat 重組大鼠 CD14 蛋白

          CCDC134重組人 CCDC134 蛋白 Protein

          小鼠IgG Fc片段(IgGFcγ)pcr檢測試劑盒

          Rat advanced glycation end products (AGEs) ELISA Kit 大鼠晚期糖基化終末產(chǎn)物(AGEs)試劑盒

          HumahromboxaneB2,TX-B2ELISAKit 人血栓素B2(TXB2)pcr檢測試劑盒分裝

          HumanCollagenaseTypeII試劑盒人膠原酶II(CollagenaseII)試劑盒規(guī)格:96T/48T

          組織ABL1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20

          HumaeceptorfoheFcregionofimmunoglobulinG,FcγRELISAKitGFc段受體Ⅲ(FcγR/CD16)試劑盒規(guī)格:96T/48T

          兔胰腺上皮細(xì)胞大鼠輕肽鐵蛋白(FTL)試劑盒 ,英文名: FTL ELISA Kit

          Mouse angiopoietin 1 (ANG-1) ELISA Kit 小鼠血管生成素1(ANG-1)試劑盒

          Ratprostatespecificaigen,PSAELISAKit 大鼠前列腺特異性抗原(PSA)pcr檢測試劑盒分裝

          CLIAKitforGSH-Pxkit(human)人過氧化物酶試劑盒

          細(xì)胞沉默調(diào)節(jié)蛋白3(SI3)活性比色法定量試劑盒20

          Ratypsinogenactivationpeptide,TAPELISAKit大鼠原激活肽(TAP)試劑盒規(guī)格:96T/48T

          原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

            一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

            1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

            2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

            3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

            4、 胎牛血清濃度為10%-80%

            5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

            6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;

            7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

            8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

            二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

            1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;

            2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

            3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗;

            4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;

            5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

            6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行


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