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上海莼試生物技術(shù)有限公司 |
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人中性粒細(xì)胞防御素3英文名稱：Human DEFA3 ELISA Kit產(chǎn)品別名：人DEFA3 elisa試劑盒用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Human DEFA3 ELISA Kit |
貨號(hào) | CS-E3682 |
試劑配制：
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
樣本處理及要求：
1. 血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過一夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測(cè)。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：請(qǐng)1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)：
1.使用前請(qǐng)保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完，請(qǐng)廢棄。
2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置，會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請(qǐng)1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?，F(xiàn)象，微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。
（加熱溫度不要超過50℃）使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號(hào)的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要，使用微量振蕩器，如無微量振蕩器，可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測(cè)時(shí)建議作雙孔檢測(cè)。
7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴(yán)禁在不同的液體之間混用！否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。
8. 試驗(yàn)中請(qǐng)穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測(cè)血液或者其他體液標(biāo)本時(shí)，請(qǐng)按國(guó)家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行。
以下是公司正在*的產(chǎn)品：
異硫氰酸熒光素(FITC)標(biāo)記糖尿病相關(guān)肽1-37Anti-CD44V6/CD44/HCAM/FITC 熒光素標(biāo)記抗CD44抗體IgG
凋亡蛋白活性因子-1（抗原）Anti-CD44v7 /FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠CD44V7抗體IgG
凋亡蛋白活性因子-1（抗原）Anti-CD45(LCA)/FITC 熒光素標(biāo)記CD45(白細(xì)胞共同抗原)抗體
雄激素受體（多肽抗原）Anti-CD45/RBITC 紅色熒光素羅丹明標(biāo)記CD45抗體 IgG
5-羥色胺受體2A抗原Anti-CD45RO/FITC 熒光素標(biāo)記CD45RO抗體IgG
人中性粒細(xì)胞防御素3ELISA試劑盒凝血酶Ⅱ(凝血因子II)抗原Anti-CD46/MCP /FITC 熒光素標(biāo)記膜輔蛋白/內(nèi)源性輔助因子活性蛋白抗體(人)IgG
5-羥色胺受體3抗原Anti-CD46/MCP /FITC 熒光素標(biāo)記膜輔蛋白/內(nèi)源性輔助因子活性蛋白抗體IgG
5-羥色胺受體4抗原Anti-CA125/Biotin 生物素標(biāo)記兔抗人CA125抗原抗體IgG
粘蛋白-2/上皮膜抗原2抗原Anti-CD48/SLAMF2/FITC 熒光素標(biāo)記CD48抗體IgG
整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗原Anti-CD44/PE 熒光素PE標(biāo)記CD44抗體IgG
血管緊張素原（抗原）Anti-CD45/PE 熒光素PE標(biāo)記兔抗人、小鼠CD45抗體IgG
5-脂氧合酶抗原Anti-CD133/Biotin 生物素化造血干細(xì)胞抗原CD133抗體
辣根過氧化物酶標(biāo)記整合素樣金屬蛋白酶與凝血酶1型-7抗原Anti-CD55/DAF/FITC 熒光素標(biāo)記衰變加速因子CD55抗體IgG
載脂蛋白E（抗原）Anti-CD56/FITC 熒光素標(biāo)記CD56抗體IgG
1,4-二羥基-9,10-蒽二Anti-CD56/NCAM1/FITC 熒光素標(biāo)記神經(jīng)細(xì)胞粘附分子1抗體IgG 炔草酸人骨形成蛋白elisa試盒
伏蟲隆 人膽酸甘油酯elisa試盒
伏殺硫人阿米巴elisa試盒
草滅平人B細(xì)胞淋巴瘤因子3elisa試盒
華法林人沙眼衣原體抗體elisa試盒
氟草胺人金屬蛋白酶組織抑制因子-3elisa試盒
草人結(jié)合珠蛋白elisa試盒
2,5-二-3-基苯酸豬組織型纖溶酶原激活elisa試盒
氟禾靈豬組織因子elisa試盒
2-[4-(3--5-三氟基-2-啶氧基)苯氧基]酸酯人軍團(tuán)菌抗體IgM ELISA
氟禾靈雞白介素4 ELISA
乳氟禾草靈 精氟禾草靈
?操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
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