詳細(xì)介紹
操作流程:
(1)待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl,每種樣品設(shè)3個平行孔;設(shè)兩個陰性對照孔,每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl;另設(shè)一個空白對照孔,加入純細(xì)胞裂解液100μl。
(2)酶標(biāo)板置4℃,包被過夜。
(3)洗板:吸干孔內(nèi)反應(yīng)液,用洗滌液過洗一遍(將洗滌液注滿板孔后,即甩去),之后將洗滌液注滿板孔,浸泡1-2分鐘,間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
(4)陰性對照孔每孔加入PBS 50μl,樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
(5)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
(8)酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi),孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB顯色液 100μl,輕輕混勻10s,置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
(12)分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,終測得的OD值為兩者之差(W1-W2),以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
(13)數(shù)據(jù)處理:在得出標(biāo)本(S)和陰性對照(N)的 OD值后,計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
人血管動蛋白英文名稱:Human AMOT ELISA Kit產(chǎn)品別名:人AMOT elisa試劑盒用于測定血清,血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Human AMOT ELISA Kit |
貨號 | CS-E3824 |
試劑配制:
1、酶聯(lián)板(Assay plate ):一塊(96孔或者48孔)。
2、標(biāo)準(zhǔn)品(Standard):2瓶(凍干品)。
3、樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
樣本處理及要求:
1. 血清:將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過一夜,然后1000×g離心20 分鐘,取上清即可,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿:用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本,并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿:用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果),稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS,具體體積可根據(jù)實驗需要適當(dāng)調(diào)整,并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞,可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎,或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本:請1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注意事項:
1.使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完,請廢棄。
2. 微量試劑運輸中顛簸和可能的倒置,會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘,以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?,F(xiàn)象,微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。
(加熱溫度不要超過50℃)使用時洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用(洗滌液和反應(yīng)終止液除外)。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要,使用微量振蕩器,如無微量振蕩器,可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時建議作雙孔檢測。
7. 試驗中所用的試管和吸頭均為一次性使用,嚴(yán)禁在不同的液體之間混用!否則將影響試驗結(jié)果。
8. 試驗中請穿著試驗服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測血液或者其他體液標(biāo)本時,請按國家生物試驗室安全防護(hù)條列執(zhí)行。
以下是公司正在*的產(chǎn)品:
細(xì)胞P21蛋白表達(dá)比色法定量檢測試盒Anti-SLC33A1/FITC 熒光素標(biāo)記酰輔酶A轉(zhuǎn)運蛋白1抗體IgG
細(xì)胞P21蛋白表達(dá)熒光定量檢測試盒Anti-SLC34A2/NaPi-2b/FITC 熒光素標(biāo)記酸鈉協(xié)同轉(zhuǎn)運蛋白抗體IgG
P21蛋白表達(dá)西方雜交分析試盒Anti-Slc26a5/Prestin/FITC 熒光素標(biāo)記外毛細(xì)胞運動蛋白/可溶性載質(zhì)轉(zhuǎn)運蛋白Slc26a5抗體IgG
P21蛋白免疫共沉淀分析試盒Anti-SLC39A6/FITC 熒光素標(biāo)記SLC39A6抗體IgG
P21蛋白表達(dá)ELISA定量檢測試盒Anti-SLC40A1/FPN1/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞膜鐵轉(zhuǎn)運蛋白SLC40A1抗體IgG
人血管動蛋白ELISA試劑盒細(xì)胞P27蛋白表達(dá)流式細(xì)胞儀檢測試盒Anti-SLK/Fyn/FITC 熒光素標(biāo)記酪酸蛋白激酶Fyn(同步原癌基因)抗體IgG
載玻片細(xì)胞P27蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試盒Anti-Slit2/Slil3/FITC 熒光素標(biāo)記兔抗人、大、小鼠神經(jīng)遷移蛋白Slit2/3抗體IgG
冰凍切片組織P27蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試盒Anti-SLT/SLT-IIe(O139) /FITC 熒光素標(biāo)記抗豬水腫素(O139)抗體IgG
石蠟切片組織P27蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試盒Anti-Slug/FITC 熒光素標(biāo)記鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug抗體IgG
載玻片細(xì)胞P27蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試盒Anti-Smac/DIABLO/FITC 熒光素標(biāo)記線粒體促凋亡蛋白抗體IgG
冰凍切片組織P27蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試盒Anti-phosphor-SMAD(p-Ser425)、phosphor-Mothers against decapentaplegic/FITC 熒光素標(biāo)記酸化SMAD抗體IgG
石蠟切片組織P27蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試盒Anti-Smad 1/FITC 熒光素標(biāo)記Smad 1抗體IgG
細(xì)胞P27蛋白表達(dá)比色法定量檢測試盒Anti-Phospho-Smad1 (Ser206) /FITC 熒光素標(biāo)記酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1抗體IgG
細(xì)胞P27蛋白表達(dá)熒光定量檢測試盒Anti-Phospho-Smad1/5 (Ser463/465)/FITC 熒光素標(biāo)記酸化細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子Smad-1/5抗體IgG
P27蛋白表達(dá)西方雜交分析試盒Anti-Smad2/3 /FITC 熒光素標(biāo)記Smad 2/3抗體IgGHRP conjugated Rabbit Anti-Sheep IgG (H+L)
HRP conjugated Rabbit Anti-Sheep IgG (H+L)HPLC≥98%凝血酶原時間(PT)測定試盒ISI1.0-1.2<含復(fù)溶液>5mgADAMTS-13Ab
Phospho-CHK2 (ser19)英文名稱:BHLHB5人血管緊張Ⅱ(2-7)免疫試盒
C1orf162 英文名稱:Cofilin人去(NA)免疫試盒
HPLC≥98%凝血酶原時間(PT)測定試盒ISI1.2-1.4<含復(fù)溶液>5mgLeucine
Clathrin heavy chain英文名稱:BPNT1人血管緊張Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅠ)免疫試盒
C1orf163英文名稱:CDMP1人趨化因子受體3(CCR3)免疫試盒
HPLC≥98%部分凝血活酶時間(APTT)測定試盒<鞣花含Cacl2>5mgIle
CD168英文名稱:BRSK2人血管緊張Ⅰ受體體(ANG-ⅠR)免疫試盒
C1orf122 英文名稱:Beta-casein人趨化因子配體17(CXCL17)免疫試盒