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上海莼試生物技術(shù)有限公司 |
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人糖基化依賴的細(xì)胞黏附分子英文名稱：GlyCAM-1 ELISA Kit產(chǎn)品別名：人GlyCAM-1 elisa試劑盒用于測定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | GlyCAM-1 ELISA Kit |
貨號 | CS-E3951 |
試劑配制：
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
樣本處理及要求：
1. 血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時或4℃過一夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會影響測量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：請1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)：
1.使用前請保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完，請廢棄。
2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置，會使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?，F(xiàn)象，微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。
（加熱溫度不要超過50℃）使用時洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要，使用微量振蕩器，如無微量振蕩器，可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測時建議作雙孔檢測。
7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴(yán)禁在不同的液體之間混用！否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。
8. 試驗(yàn)中請穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測血液或者其他體液標(biāo)本時，請按國家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行。
以下是公司正在*的產(chǎn)品：
體液α-L-巖藻糖苷酶（AFU）比色法定量檢測試盒Trop-2/Tpm2 peptide 原肌球蛋白抗原
細(xì)胞α-L-巖藻糖苷酶（AFU）熒光定量檢測試盒TSARG4(Testis and spermatogenesis related gene 4) 生精細(xì)胞凋亡相關(guān)基因4抗原
組織α-L-巖藻糖苷酶（AFU）熒光定量檢測試盒TSGF(Tumor Specific Growth Fanctor) 惡性腫瘤特異性生長因子抗原
血液α-L-巖藻糖苷酶（AFU）熒光定量檢測試盒CIDEB peptide CIDEB抗原
體液α-L-巖藻糖苷酶（AFU）熒光定量檢測試盒Tsg101(Tumor susceptibility gene 101 protein) Tsg101抗原
細(xì)胞總脂肪酶（lipase）活性比色法定量檢測試盒TSHR (Thyroid stimulating hormone receptor) 促狀腺素受體抗原
組織總脂肪酶（lipase）活性比色法定量檢測試盒MAP1LC3A(microtubule-associated protein 1 light chain 3) 自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3抗原
人糖基化依賴的細(xì)胞黏附分子ELISA試劑盒血液總脂肪酶（lipase）活性比色法定量檢測試盒TSLC1 (tumor suppressor in lung cancer-1) 肺癌腫瘤阻抑基因1抗原
體液總脂肪酶（lipase）活性比色法定量檢測試盒TTF-1 (Thyroid Transcription Factor-1) 狀腺核轉(zhuǎn)錄因子-1抗原
肝脂酶活性比色法定量檢測試盒Tubulin- Gamma 微管蛋白-γ抗原
脂蛋白脂酶活性比色法定量檢測試盒TWIST protein peptide TWIST蛋白抗原
溶酶體脂酶（酸性脂酶）活性比色法定量檢測試盒T Beta10 peptide 胸腺素β10抗原
胰腺脂酶活性比色法定量檢測試盒UCN(Urocortin)mouse ret 新型血管活性因子UCN抗原(小鼠、大鼠)
γ谷?；D(zhuǎn)移酶（GGT）定量檢測試盒USF-1(upstream stimulatory factor 1) 上游刺激因子1抗原
組織前列腺型酸性酸酶（PACP）活性比色法定量檢測試盒Ubiquitin 泛素蛋白抗原Bovine LGMN(Legumain) ELISA Kit
Bovine LGMN(Legumain) ELISA KitCD35英文名稱：phospho-B-Raf (Thr597)人血清淀粉樣蛋白A4(SAA4)免疫試盒
英文名稱：HMGB1 (High Mobility Group Box protein 1)上皮細(xì)胞原BA46體
14-3-3 gamma英文名稱：TCF12腸和大腦特定同源蛋白2抗體
Collagen VIII alpha 1英文名稱：phospho-Bcl-xL (Thr115)人血清淀粉樣蛋白A3(SAA3)免疫試盒
英文名稱：Hirudin擬南介金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白體
14-3-3 sigma英文名稱：TMP21甘轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白1抗體
CITED1英文名稱：BTG3人血清淀粉樣蛋白A(SAA)免疫試盒
英文名稱：HPV16 E6 protein中核仁蛋白體
14-3-3 Tau英文名稱：TSBP生長激素釋放激素同源盒蛋白1抗體
操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標(biāo)準(zhǔn)。
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