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產(chǎn)品簡介
新港沙門氏菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒所謂實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
詳細介紹
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Salmonella newport |
貨號 | CP934686 |
產(chǎn)品特征:
新港沙門氏菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒靈敏度高：能對低拷貝或多樣性模板進行定量。
特異性強：采用熱啟動酶的激活機制，抑制非特異性擴增 。
重復性好：擴增曲線重合度高，受干擾影響少。
擴增效率高：擴增曲線Ct值低，起峰快，效率高。
原理:
所謂實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。產(chǎn)品僅用于科研
檢測方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。
熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
以下是新港沙門氏菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：
RELN/Reelin 絡(luò)絲蛋白抗體人AT豐富結(jié)合域1A(ARID1A)ELISA試盒
RELMa/RELM alpha 抵抗素樣分子α抗體人Apelin ELISA試盒
RELM beta/CCGR 結(jié)腸癌相關(guān)基因蛋白抗體人Apelin 36(AP36)ELISA試盒
RelB 轉(zhuǎn)錄因子RelB蛋白抗體人apelin 13(AP13)ELISA試盒
RelB 核轉(zhuǎn)錄因子NFKB-RelB蛋白抗體人apelin 12(AP12)ELISA試盒
Relaxin 1 松弛肽/松弛素抗體人AP-5復合物β亞基(PP1030)ELISA試盒
Regucalcin/SMP30 衰老標記蛋白30抗體人alpha突觸核蛋白（淀粉樣前體非A4成分蛋白）低聚物(SNCA oligomer)ELISA試盒
REG4/RELP 再生基因蛋白4抗體人Alpha-D 生育酚/維生素E(Alpha-D TPL)ELISA試盒
Reg3a 胰島β細胞生長因子抗體人alpha-1腎上腺素能受體(ADRA1)IgG抗體ELISA試盒
Reg3 gamma 胰島β細胞生長因子Reg IIIγ抗體人AFG3樣蛋白2(AFG3L2)ELISA試盒
新港沙門氏菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒Reg3 beta 胰島β細胞生長因子Reg IIIα 抗體人Adropin(ENHO)ELISA試盒
REG1β/REG1 beta 胰島細胞再生因子β抗體人ADP-核糖基化因子5(ARF5)ELISA試盒
REG1A 胰島細胞再生因子ICRF抗體人ADP-核糖基化因子4(ARF4)ELISA試盒
REF-1/APEX1 多功能DNA修復酶抗體人ADAM金屬肽酶含血小板反應蛋白1基元4(ADAMTS4)ELISA試盒
REEP5 受體表達蛋白5/息肉相關(guān)蛋白抗體人8異前列腺素F2α(8-iso-PGF2a)ELISA試盒豬高致病性藍耳病RT-PCR檢測試盒低溫運輸，-20℃保存50T
豬肺炎支原體PCR檢測試盒低溫運輸，-20℃保存50T
豬膽鹽Pig Bile Salts室溫保存25g
豬丹桿菌PCR檢測試盒低溫運輸，-20℃保存50T
豬傳染性胃腸炎病定量RT-PCR檢測試盒TGEV Fluorescent RT-PCR Kit低溫運輸，-20℃保存50T
豬布桿菌PCR檢測試盒低溫運輸，-20℃保存50T
豬、牛、羊布魯菌病PCR檢測試盒低溫運輸，-20℃保存50T
周細胞生長因子Growth Factor For Cell Culture-20℃保存5mL
重組蛋白LRecombinant Protein L-20℃保存1mg
重組蛋白GRecombinant Protein G-20℃保存1mg
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
具有下列特點：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結(jié)果。產(chǎn)品僅用于科研