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產(chǎn)品簡介
印度血吸蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應，具有廣泛的用途。
詳細介紹
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
具有下列特點：
1.產(chǎn)品僅用于科研即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強。預期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結果。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Staphylococcus sciuri |
貨號 | CP934738 |
產(chǎn)品特征:
松鼠葡萄球菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒靈敏度高：能對低拷貝或多樣性模板進行定量。
特異性強：采用熱啟動酶的激活機制，抑制非特異性擴增 。
重復性好：擴增曲線重合度高，受干擾影響少。
擴增效率高：擴增曲線Ct值低，起峰快，效率高。
原理:
所謂實時熒光定量PCR技術，是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
檢測方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，產(chǎn)品僅用于科研使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。
熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
以下是松鼠葡萄球菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關產(chǎn)品：
PSMD6/P44S10 蛋白酶調(diào)解因子6抗體大鼠表皮生長因子(EGF)ELISA試盒
PSMD10/Proteasome 26S S10 蛋白酶調(diào)解因子10抗體大鼠胞外銅鋅超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD/SOD3)ELISA試盒
PSMC1/Proteasome 19S S4 26S蛋白酶調(diào)節(jié)亞型抗體大鼠胞漿型脂酶A2(cPLA2)ELISA試盒
PSGL-1/CD162 P選擇素糖蛋白配體1抗體大鼠膀胱腫瘤抗原(BTA)ELISA試盒
PSGD/HOXB13 同源盒蛋白HOXB13抗體大鼠半胱氨酸蛋白酶抑制/胱抑素C(Cys-C)ELISA試盒
PSF2 PSF2蛋白抗體大鼠白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試盒
P-selectin/CD62p P選擇素抗體大鼠白血病抑制因子(LIF)ELISA試盒
PSD95 突觸后密度蛋白95抗體大鼠白細胞抗原DR(HLA-DR)ELISA試盒
PSD93 突觸后密度蛋白93抗體大鼠白細胞活化黏附因子(ALCAM)ELISA試盒
松鼠葡萄球菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒PSCDBP/CYTIP 胞粘蛋白結合調(diào)節(jié)蛋白抗體大鼠白三烯E4(LTE4)ELISA試盒
PSCD1 細胞附著蛋白PSCD1抗體大鼠白三烯D4(LTD4)ELISA試盒
PSCA 前列腺干細胞抗原抗體大鼠白三烯C4(LTC4)ELISA試盒
PSAP/PAP 前列腺酸性酸酶抗體大鼠白三烯B4(LTB4)ELISA試盒
PSAP 鞘脂激活蛋白原抗體大鼠白介素9(IL-9)ELISA試盒
PSA(PA5) 鼠抗人前列腺特異性抗原單克隆抗體(檢測)大鼠白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試盒鐵化鉀Potassium Ferrocyanide室溫保存500g
填入法DNA末端標記試盒CFill-in DNA End Labeling Kit-20℃保存5次
填入法DNA末端標記試盒BFill-in DNA End Labeling Kit-20℃保存5次
填入法DNA末端標記試盒AFill-in DNA End Labeling Kit-20℃保存5次
甜菜鹽酸鹽Betaine Hydrochloride室溫保存100g
甜菜溶液，5M，PCR級Betaine Solution, PCR Grade4℃保存1.5mL
甜菜Betaine4℃保存10g
天然蛋白ANative Protein A-20℃保存1mg
天門冬酰胺酶L-Asparaginase4℃保存250U
天狼猩紅Sirius Rosa BB室溫保存5g