詳細(xì)介紹
產(chǎn)品特征:
靈敏度高:能對低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量。
特異性強(qiáng):采用熱啟動酶的激活機(jī)制,抑制非特異性擴(kuò)增 。
重復(fù)性好:擴(kuò)增曲線重合度高,受干擾影響少。
擴(kuò)增效率高:擴(kuò)增曲線Ct值低,起峰快,效率高。
原理:
所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監(jiān)測整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。產(chǎn)品僅用于科研
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Streptococcus sui |
貨號 | CP934758 |
豬鏈球菌通用探針法熒光定量PCR檢測試劑盒熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
檢測方法:
1.Ⅰ法:
在PCR反應(yīng)體系中,加入過量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,發(fā)射熒光信號,而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號,從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴(kuò)增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法:
探針完整時(shí),產(chǎn)品僅用于科研報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號被淬滅基團(tuán)吸收;PCR擴(kuò)增時(shí),Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號,即每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
具有下列特點(diǎn):
1.即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。
以下是豬鏈球菌通用探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:
Phospho-TrkA (Tyr785)/TrkB (Tyr816) 酸化酪氨酸激酶A抗體猴B病(BV)ELISA試盒
Phospho-TrkA (Tyr674/675)/TrkB (Tyr706/707) 酸化酪氨酸激酶A抗體猴25羥基維生素D3(25 HVD3)ELISA試盒
Phospho-TrkA (Tyr490)/TrkB (Tyr516) 酸化酪氨酸激酶A抗體倉鼠ELISA試盒
Phospho-TrkA (Ser791) 酸化酪氨酸激酶A抗體倉鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA試盒
phospho-TRIM25(The91) 酸化雌激素反應(yīng)指狀蛋白抗體倉鼠腫瘤壞死因子α(TNF-α)ELISA試盒
phospho-TRIM25(Ser100) 酸化雌激素反應(yīng)指狀蛋白抗體倉鼠脂氧素A4(LXA4)ELISA試盒
phospho-TRAP220/MED1(Thr1457) 酸化狀腺受體相關(guān)蛋白220抗體倉鼠脂聯(lián)素,含C1Q和膠原域(ADIPOQ)ELISA試盒
phospho-TRADD(Ser299) 酸化腫瘤壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白抗體倉鼠載脂蛋白B(APOB)ELISA試盒
phospho-TRADD(Ser274) 酸化腫瘤壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白抗體倉鼠血紅素氧合酶1(HO-1)ELISA試盒
豬鏈球菌通用探針法熒光定量PCR檢測試劑盒phospho-TRADD(Ser269) 酸化腫瘤壞死因子受體1相關(guān)死亡域蛋白抗體倉鼠心肌肌鈣蛋白I(TNNI3)ELISA試盒
phospho-TPH(Ser260) 酸化色氨酸羥化酶抗體倉鼠細(xì)胞色素P450,家族7亞科A多肽1(CYP7A1)ELISA試盒
phospho-TPH(Ser19) 酸化色氨酸羥化酶抗體倉鼠鐵蛋白(FE)ELISA試盒
Phospho-Torc2/Crtc2(Ser171) 酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體倉鼠瘦素(LEP)ELISA試盒
Phospho-Torc1/Crtc1 (Ser151) 酸化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC1抗體倉鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA試盒
phospho-TOPO II Alpha (Ser1106) 酸化DNA拓普西異構(gòu)酶Ⅱ抗體倉鼠可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)ELISA試盒人血液和骨髓造血干細(xì)胞分離液 1.068-1Cell Separation Solution-20℃保存200 mL
人血清白蛋白 VAlbumin Human Serum, FractionⅤ4℃保存500mg
人血管生長因子VEGF-cPCR檢測試盒低溫運(yùn)輸,-20℃保存50T
人雄激素受體基因多態(tài)性檢測試盒低溫運(yùn)輸,-20℃保存50T
人線粒體DNA11778位點(diǎn)突變PCR測定試盒低溫運(yùn)輸,-20℃保存50T
人線粒體DNA PCR檢測試盒低溫運(yùn)輸,-20℃保存50T
人細(xì)小病B19PCR檢測試盒低溫運(yùn)輸,-20℃保存50T
人細(xì)胞色素P450基因PCR檢測試盒低溫運(yùn)輸,-20℃保存50T
人外周血AFP mRNA表達(dá)水平PCR檢測試盒低溫運(yùn)輸,-20℃保存50T
人生殖道支原體通用型PCR檢測試盒低溫運(yùn)輸,-20℃保存50T