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上海莼試生物技術(shù)有限公司 |
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人橋粒芯糖蛋白1抗體英文名稱：Human desmogleins 1 antibody IgG ELISA Kit產(chǎn)品別名：人IgG elisa試劑盒用于測(cè)定血清，血漿及相關(guān)液體等樣本。例如適合檢測(cè)包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本。
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Human desmogleins 1 antibody IgG ELISA Kit |
貨號(hào) | CS-E4090 |
試劑配制：
1、酶聯(lián)板（Assay plate ）：一塊（96孔或者48孔）。
2、標(biāo)準(zhǔn)品（Standard）：2瓶（凍干品）。
3、樣品稀釋液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素標(biāo)記抗體稀釋液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素稀釋液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素標(biāo)記抗體（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、濃洗滌液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
樣本處理及要求：
1. 血清：將收集于血清分離管的全血標(biāo)本在室溫放置2小時(shí)或4℃過(guò)一夜，然后1000×g離心20 分鐘，取上清即可，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 血漿：用EDTA或肝素作為抗凝劑采集標(biāo)本，并將標(biāo)本在采集后的30分鐘內(nèi)于2-8℃ 1000×g離心15分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
3. 組織勻漿：用預(yù)冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織，去除殘留血液（勻漿中裂解的紅細(xì)胞會(huì)影響測(cè)量結(jié)果），稱重后將組織剪碎。將剪碎的組織與對(duì)應(yīng)體積的PBS（一般按1:9的重量體積比，比如1g的組織樣品對(duì)應(yīng)9mL的PBS，具體體積可根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要適當(dāng)調(diào)整，并做好記錄。推薦在PBS中加入蛋白酶抑制劑）加入玻璃勻漿器中，于冰上充分研磨。為了進(jìn)一步裂解組織細(xì)胞，可以對(duì)勻漿液進(jìn)行超聲破碎，或反復(fù)凍融。后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘，取上清檢測(cè)。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)物上清或其它生物標(biāo)本：請(qǐng)1000×g離心20分鐘，取上清即可檢測(cè)，或?qū)⑸锨逯糜?20℃或-80℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)：
1.使用前請(qǐng)保存在2-8℃。復(fù)溶后的標(biāo)準(zhǔn)品若未用完，請(qǐng)廢棄。
2. 微量試劑運(yùn)輸中顛簸和可能的倒置，會(huì)使液體沾到管壁或瓶蓋。因此使用前請(qǐng)1000轉(zhuǎn)/分離心1分鐘，以使附著管壁或瓶蓋的液體沉積到管底。
3. 從冰箱中取出的濃縮洗滌液可能有結(jié)晶,屬于正?，F(xiàn)象，微加熱至40℃使結(jié)晶*溶解后再配制洗滌液。
（加熱溫度不要超過(guò)50℃）使用時(shí)洗滌液應(yīng)為室溫。
4. 不同批號(hào)的試劑盒組份避免混用（洗滌液和反應(yīng)終止液除外）。
5. 充分輕微混勻?qū)Ψ磻?yīng)結(jié)果尤為重要，使用微量振蕩器，如無(wú)微量振蕩器，可在反應(yīng)孵育前手工輕輕混勻。
6. 在試驗(yàn)中標(biāo)準(zhǔn)品和樣本檢測(cè)時(shí)建議作雙孔檢測(cè)。
7. 試驗(yàn)中所用的試管和吸頭均為一次性使用，嚴(yán)禁在不同的液體之間混用！否則將影響試驗(yàn)結(jié)果。
8. 試驗(yàn)中請(qǐng)穿著試驗(yàn)服并帶乳膠手套做好防護(hù)工作。特別是檢測(cè)血液或者其他體液標(biāo)本時(shí)，請(qǐng)按國(guó)家生物試驗(yàn)室安全防護(hù)條列執(zhí)行。
以下是公司正在*的產(chǎn)品：
2-acetylbenzothiopheneHPL(Human placenta lactogen) ELISA Kit 人胎盤催乳素
N-芐氧羰基纈酸酯HBF(Human anti-cytomegalovirus IgM antibody) ELISA Kit 人胎兒血紅蛋白
7-triethylsilyl-13-oxobaccatin IIIanti-CMV IgM(Human anti-cytomegalovirus IgM antibody) ELISA Kit 人抗巨細(xì)胞病抗體IgM
6 -（N-三氟酰基）基己酸酯anti-tox IgM(Human anti-toxoplasma IgG antibody) ELISA Kit 人抗弓形體IgM抗體
4-nitro-1h-imidazole-1-ethanolanti-RV IgG(Human anti-rubella virus IgG antibody) ELISA Kit 人抗風(fēng)疹病IgG抗體
N-（1-脫氧野尻霉素7-oxa-9,9,9-trifluorononyl）EBV(Human anti-Epstein-Barr virus antibody) ELISA Kit 人抗EB病抗體
羥基卡立普多（非對(duì)映異構(gòu)體的混合物）PGR(Human progesterone receptor) ELISA Kit 人孕受體
尿苷二酸-α-D-半乳糖ul-13c6 ] [鈉N-TSH(Human Neonatal Thyroid Stimulating Hormone) ELISA Kit 人新生兒促狀腺素
人橋粒芯糖蛋白1抗體ELISA試劑盒d-homo布地德SP1/PS Beta1-G(Human Pregnancy Specific Beta1Glycoprotein) ELISA Kit 人妊娠特異性β1糖蛋白
群多普利?；? d-glucuronide，85PL(Human placetal lactogen) ELISA Kit 人胎盤泌乳素
d-glucitol-4,5-d2ABP(Human Androgen Binding Protein) ELISA Kit 人雄激素結(jié)合蛋白
6-maleimidocaproic酸磺基-N-琥珀酰亞胺基酯ATA(Human anti-trophoblast antibody,ATA ) ELISA Kit 人抗滋養(yǎng)膜細(xì)胞抗體
1,5-diazido-3-oxapentaneaZP(Human anti-zona pellucida antibody,aZP) ELISA Kit 人抗透明帶抗體
（1S，4S）- N-去基鹽酸舍曲林AOAb(Human Anti-Ovary Antibody,AOAb) ELISA Kit 人抗卵巢抗體
（S）-呋洛爾鹽酸鹽anti-CMV IgG(Human anti-cytomegalovirus IgG antibody,anti-CMV IgG) ELISA Kit 人抗巨細(xì)胞病抗體IgGChicken ANXA5(Annexin A5) ELISA Kit
Chicken ANXA5(Annexin A5) ELISA Kit英文名稱：Batroxobin細(xì)胞遷移誘導(dǎo)因子5體
高化學(xué),合成試, 1-Boc-嗪
Secretin receptor英文名稱：phospho-Tau protein(Ser721)化GATA結(jié)合蛋白3抗體
英文名稱：BrdU (Bromodeoxyuridine)致癌因體
高化學(xué),固相合成, 2,4,6-三芐
beta Sarcoglycan英文名稱：phospho-Tau protein(Ser214)化GATA結(jié)合蛋白3抗體
英文名稱：Beta Amyloid 29-40絲裂原活化蛋白激酶MAP4K5體
高化學(xué),合成試, 1-Boc-嗪
Phospho-Syk (Tyr323)英文名稱：phospho-Tau protein(Ser199)延伸因子G2抗體
操作流程：
（1）待測(cè)樣品孔中每孔加入待測(cè)樣品100μl，每種樣品設(shè)3個(gè)平行孔；設(shè)兩個(gè)陰性對(duì)照孔，每孔加未處理組的細(xì)胞裂解液100μl；另設(shè)一個(gè)空白對(duì)照孔，加入純細(xì)胞裂解液100μl。
（2）酶標(biāo)板置4℃，包被過(guò)夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過(guò)洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動(dòng)。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復(fù)洗滌3-4次。
（4）陰性對(duì)照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標(biāo)記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標(biāo)板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測(cè)450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測(cè)得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標(biāo)本（S）和陰性對(duì)照（N）的 OD值后，計(jì)算S/N值。S/N≥2.1為陽(yáng)性判定標(biāo)準(zhǔn)。
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