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產品簡介
絮狀表皮癬菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應，具有廣泛的用途。
詳細介紹
產品特征:
靈敏度高：能對低拷貝或多樣性模板進行定量。
特異性強：采用熱啟動酶的激活機制，抑制非特異性擴增 。
重復性好：擴增曲線重合度高，受干擾影響少。
擴增效率高：擴增曲線Ct值低，起峰快，效率高。
原理:
所謂實時熒光定量PCR技術，是指在PCR反應體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。產品僅用于科研
產品名稱 | |
英文名稱 | Epidermophyton floccosum |
貨號 | CP934207 |
絮狀表皮癬菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
檢測方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產物的增加*同步。
定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時，產品僅用于科研報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產物的形成*同步。
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調移液器（2 µL、20µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
具有下列特點：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準確快速。
2. 引物經過優(yōu)化，特異性強。預期的 PCR 產物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結果。
以下是絮狀表皮癬菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關產品：
3-氟-4-基苯醛非同位素HRP－DAB顯色法DNA斑點雜交試盒
6-氰基-2-萘酚非同位素AP－BCIP/NBT法DNA斑點雜交試盒
1--4-氟萘寡核苷酸探針同位素法DNA斑點雜交*試盒
6-氨基-3-基苯酚鹽酸鹽寡核苷酸探針非同位素HRP化學發(fā)光法DNA斑點雜交*試盒
N-基正戊胺寡核苷酸探針非同位素AP化學發(fā)光法DNA斑點雜交*試盒
3,5-二氟-2-吡啶羧酸寡核苷酸探針非同位素HRP－DAB顯色法DNA斑點雜交*試盒
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2-碘-5-基苯胺 醛RNA電泳上樣緩沖液（RNA酶保護）
絮狀表皮癬菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒他莫昔芬6倍蔗糖DNA電泳上樣緩沖液
3-肉桂醛6倍聚蔗糖DNA電泳上樣緩沖液
3,4-二-5-氟硝基苯6倍三醇DNA電泳上樣緩沖液
2-基環(huán)己胺6倍堿性凝膠DNA電泳上樣緩沖液
吡啶-2-酰鹽酸鹽RNA電泳樣品處理液
2--4-三氟基苯酸分子生物級化錠（Ethidium Bromide）染色液（1毫克/毫升）或（10毫克/毫升）月桂酸酯 Methyl Laurate111-82-01ml/支，供脂肪酸組成檢查用
月桂酸二十烷醇酯/月桂酸花生醇酯(C12:0-C20:0)36617-18-2月桂酸二十烷醇酯/月桂酸花生醇酯(C12:0-C20:0),標準品，有證書 ,100mg/500mg/1gm
月桂酸二十二烷醇酯/月桂酸山崳醇酯(C12:0-C22:0)42231-82-3月桂酸二十二烷醇酯/月桂酸山崳醇酯(C12:0-C22:0),標準品，有證書 ,100mg/500mg/1gm
月桂酸膽固醇酯/膽固醇十二烷酸酯/膽固醇月桂酸酯(C12:0)3235月桂酸膽固醇酯/膽固醇十二烷酸酯/膽固醇月桂酸酯(C12:0),標準品，有證書 ,100mg/500mg/1gm
月桂氮卓酮,試59227-89-3月桂氮卓酮,試,有COA ,250mg
預知子（三葉木通）4.0g
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玉米瓊脂對照培養(yǎng)基Corn Meal Agar Reference Medium5.1g/300ml/袋
玉米（地）-10克(非轉基因)玉米（地）-10克(非轉基因),標準品，有證書 ,10g
玉米（地）-10克(非轉基因)玉米（地）-10克(非轉基因),標準品，有證書 ,10g