詳細(xì)介紹
產(chǎn)品名稱(chēng) | |
英文名稱(chēng) | Chlamydia pneumoniae |
貨號(hào) | CP934057 |
產(chǎn)品特征:
肺炎衣原體探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒靈敏度高:能對(duì)低拷貝或多樣性模板進(jìn)行定量。
特異性強(qiáng):采用熱啟動(dòng)酶的激活機(jī)制,抑制非特異性擴(kuò)增 。
重復(fù)性好:擴(kuò)增曲線(xiàn)重合度高,受干擾影響少。
擴(kuò)增效率高:擴(kuò)增曲線(xiàn)Ct值低,起峰快,效率高。
原理:
所謂實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號(hào)積累實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)整個(gè)PCR進(jìn)程,后通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)對(duì)未知模板進(jìn)行定量分析的方法。產(chǎn)品僅用于科研
檢測(cè)方法:
1.Ⅰ法:
在PCR反應(yīng)體系中,加入過(guò)量SYBR熒光染料,SYBR熒光染料特異性地?fù)饺隓NA雙鏈后,發(fā)射熒光信號(hào),而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會(huì)發(fā)射任何熒光信號(hào),從而保證熒光信號(hào)的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴(kuò)增熒光曲線(xiàn)圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線(xiàn)圖
2.TaqMan探針?lè)ǎ?br />探針完整時(shí),報(bào)告基團(tuán)發(fā)射的熒光信號(hào)被淬滅基團(tuán)吸收;PCR擴(kuò)增時(shí),Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解,使報(bào)告熒光基團(tuán)和淬滅熒光基團(tuán)分離,從而熒光監(jiān)測(cè)系統(tǒng)可接收到熒光信號(hào),即每擴(kuò)增一條DNA鏈,就有一個(gè)熒光分子形成,實(shí)現(xiàn)了熒光信號(hào)的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。
熒光定量PCR實(shí)驗(yàn)步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時(shí)離心前不可見(jiàn)的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀。混勻后,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時(shí),先加入無(wú)RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測(cè)定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計(jì)調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計(jì)260nm和280nm處的吸收值,測(cè)定RNA溶液 濃度和純度。
以下是肺炎衣原體探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品:
2-硝基-4--6-苯胺人結(jié)締組織活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA Kit,48T/96T
乳酸鉀人表皮細(xì)胞活化肽因子(CAPF)ELISA Kit,48T/96T
3,5,6-三水楊酸人尿素酶相關(guān)蛋白C(UreC)ELISA Kit,48T/96T
4-吡啶-2,6-二羧酸酯人B細(xì)胞連接蛋白(BLNK)ELISA Kit,48T/96T
5-芐氧基吲哚-3-醛人B-淋巴細(xì)胞趨化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA Kit,48T/96T
2--2'-氟苯酮人神經(jīng)趨化蛋白(fractalkine/CX3CL1)ELISA Kit,48T/96T
L-天門(mén)冬氨酸鎂人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因β(GROβ/CXCL2/MGSA)ELISA Kit,48T/96T
1H-吡咯并[3,2-B]吡啶-2-羧酸人生長(zhǎng)調(diào)節(jié)致癌基因γ(GROγ/CXCL3/MGSA)ELISA Kit,48T/96T
5--2-芐氧基-6-基吡啶人酯酰肌醇特異性酯酶C(PIPLC)ELISA Kit,48T/96T
DL-3-氨基-3-(2-萘基)酸人糖脂酰肌醇(GPI)ELISA Kit,48T/96T
2-(三基硅基)噻吩人胸腎表達(dá)趨化因子(BRAK/CXCL14)ELISA Kit,48T/96T
2-噻吩腈小鼠抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體(dsDNA)ELISA Kit,48T/96T
肺炎衣原體探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒GMO轉(zhuǎn)基因元件檢測(cè)
CP4-EPSPS轉(zhuǎn)基因元件探針?lè)晒舛縋CR試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件7S 3‘終止子LAMP試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件7S 3‘終止子PCR試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件7S 3‘終止子染料法qPCR試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件7S 3‘終止子探針?lè)╭PCR試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件adh1啟動(dòng)子LAMP試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件adh1啟動(dòng)子PCR試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件adh1啟動(dòng)子染料法qPCR試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件adh1啟動(dòng)子探針?lè)╭PCR試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件atsIA啟動(dòng)子LAMP試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件atsIA啟動(dòng)子PCR試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件atsIA啟動(dòng)子染料法qPCR試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件atsIA啟動(dòng)子探針?lè)╭PCR試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件CaMV35S啟動(dòng)子LAMP試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件CaMV35S啟動(dòng)子PCR試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件CaMV35S啟動(dòng)子染料法qPCR試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件CaMV35S啟動(dòng)子探針?lè)╭PCR試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件CaMV35終止子LAMP試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件CaMV35終止子PCR試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件CaMV35終止子染料法qPCR試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件CaMV35終止子探針?lè)╭PCR試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件CMoVb啟動(dòng)子LAMP試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件CMoVb啟動(dòng)子LAMP試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件CMoVb啟動(dòng)子PCR試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件CMoVb啟動(dòng)子PCR試劑盒
轉(zhuǎn)基因元件CMoVb啟動(dòng)子染料法qPCR試劑盒
需要自備的器材:
1.儀器:分析天平、離心機(jī)、熒光 PCR 擴(kuò)增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器(2 µL、20µL、200 µL、1000 µL)。
2.耗材:熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯(DEPC)水
處理的滅菌離心管、吸頭(10 µL、200 µL、1000 µL)、滅菌雙蒸水。
具有下列特點(diǎn):
1.即開(kāi)即用,用戶(hù)只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡(jiǎn)單,定量準(zhǔn)確快速。
2. 引物經(jīng)過(guò)優(yōu)化,特異性強(qiáng)。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長(zhǎng)度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料,PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽(yáng)性對(duì)照,便于分析試驗(yàn)結(jié)果。產(chǎn)品僅用于科研