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        1. 產(chǎn)品展廳收藏該商鋪

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          上海莼試生物技術(shù)有限公司>供求商機(jī)>50T-牛仰口線蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒
          50T-牛仰口線蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒
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          • 50T-牛仰口線蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒

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          貨物所在地: 上海上海市
          產(chǎn)地: 進(jìn)口、國產(chǎn)
          更新時間: 2024-07-01 14:12:29
          期: 2024年7月1日--2025年7月1日
          已獲點(diǎn)擊: 68
          在線詢價收藏產(chǎn)品

          (聯(lián)系我們,請說明是在 化工儀器網(wǎng) 上看到的信息,謝謝?。?/p>

          產(chǎn)品簡介

          牛仰口線蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒所謂實(shí)時熒光定量PCR技術(shù),是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實(shí)時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。

          詳細(xì)介紹

          注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。

          產(chǎn)品名稱

          牛仰口線蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒

          英文名稱

          Bunostomum phlebotomum

          貨號

          CP934004

          儲存條件:

          14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
          1. 血清:使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管,操作過程中避免任何細(xì)胞刺激,收集血液后,3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。
          2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉(zhuǎn)離心30 分鐘取上清。
          3. 細(xì)胞上清液:3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
          4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉(zhuǎn)離心10 分鐘取上清。
          5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復(fù)凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

          探針法:

          牛仰口線蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒aqMan 探針是一種寡核苷酸探針,它的熒光與目的序列的擴(kuò)增相關(guān)。它與目標(biāo)序列上游引物和下游引物之間的序列配對。熒光基團(tuán)連接在探針的5’ 末端,而淬滅劑則在3’ 末端。當(dāng)完整的探針與目標(biāo)序列配對時,熒光基團(tuán)發(fā)射的熒光因與3’ 端的淬滅劑接近而被淬滅。但在進(jìn)行延伸反應(yīng)時,聚合酶的5’ 外切酶活性將探針進(jìn)行酶切,使得熒光基團(tuán)與淬滅劑分離。隨著擴(kuò)增循環(huán)數(shù)的增加,釋放出來的熒光基團(tuán)不斷積累。因此熒光強(qiáng)度與擴(kuò)增產(chǎn)物的數(shù)量呈正比關(guān)系。相對于染料法,Taqman探針法具有更高的特異性和準(zhǔn)確性。
          使用方法:
          一、樣品DNA的制備
          用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
          二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線(以10-10E6這6個10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的DN段作為陽性對照。
          1. 標(biāo)記6個離心管,分別為6,5,4,3,2和1號。
          2. 用帶芯槍頭分別加入45 μL超純水(用帶芯槍頭,下同)。
          3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用TE緩沖液或超純水10倍梯度稀釋到10E7拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標(biāo)準(zhǔn)品一次性稀釋至10E7拷貝/μL,建議每次稀釋10倍,梯度稀釋至10E7拷貝/μL)。
          4. 在6號管中加入5 μL 10E7拷貝/μL的O157:H7陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩1分鐘,得10E6拷貝/μL的陽性對照。
          5. 換槍頭,從6號管中取5 μL溶液到5號管中,充分震蕩1分鐘,得10E5拷貝/μL的陽性對照。
          6. 換槍頭,從5號管中取5 μL溶液到4號管中,重復(fù)上面的操作直到得到6個稀釋度的陽性對照。
          7. NC管中不加任何陽性對照。
          8. 從1-6號管中分別取5 μL和待測樣品一起進(jìn)行定量PCR(見下步),每個樣品做3次重復(fù)。PCR后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光PCR Ct值,并以之為縱軸,以濃度的對數(shù)值為橫軸,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
          探針熒光定量PCR試劑盒原理分析如下圖:

          應(yīng)用案例:
          樣品 DNA 的制備
          1.用自選方法純化樣品的 DNA,本試劑盒跟市場上大多數(shù)病毒 DNA 提取試劑盒兼 容。。也可以選購本公司的一管式病毒 DNAout 或其升級版柱式病毒 DNAout。 本試劑盒免費(fèi)贈送 15 次 DNA 病毒裂解液試用裝(一管式病毒 DNAout 的成分)。
          稀釋陽性對照(以 10E2-10E7 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的長為 86bp 的 DN段作為陽性對照。
          2.標(biāo)記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
          3.用帶芯槍頭分別加入 45 μL 模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
          4.在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。5.換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
          6.換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
          7.換槍頭,在 4 號管中加 5 μL 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照到 4 號管中,得1×10E4 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
          8.重復(fù)上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。設(shè)置 qPCR 反應(yīng)(20  μL 體系,在樣品制備室進(jìn)行)
          9.在 PCR 管中加入下列成分。
          以下是公司正在*的產(chǎn)品:

          三亞基硫代酰胺標(biāo)準(zhǔn)品兔子促黃體激素(LH)ELISA Kit,48T/96T  

          替沃噻噸標(biāo)準(zhǔn)品人粘蛋白/粘液素5B(MUC5B)ELISA Kit,48T/96T

          (E)-替沃噻噸標(biāo)準(zhǔn)品小鼠抗?fàn)钕龠^氧化物酶抗體(TPO-Ab)ELISA Kit,48T/96T  

          通佐銨標(biāo)準(zhǔn)品豬血纖蛋白原(Fbg)ELISA Kit,48T/96T

          噻匹定相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品人心鈉肽(ANP)ELISA Kit,48T/96T

          噻匹定相關(guān)物質(zhì)B標(biāo)準(zhǔn)品大鼠活化素A受體抗體((ACV-RAb)ELISA Kit,48T/96T

          L-蘇氨酸標(biāo)準(zhǔn)品兔核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA Kit,48T/96T  

          百里酚標(biāo)準(zhǔn)品犬紅細(xì)胞生成素(EPO)ELISA Kit,48T/96T

          噻加賓相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品犬γ干擾素(IFN-γ)ELISA Kit,48T/96T  

          鹽酸噻加賓外消旋混合物標(biāo)準(zhǔn)品犬白介素2(IL-2)ELISA Kit,48T/96T  

          鹽酸噻加賓標(biāo)準(zhǔn)品犬白介素4(IL-4)ELISA Kit,48T/96T  

          牛仰口線蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒延胡索酸泰妙菌素標(biāo)準(zhǔn)品犬白介素6(IL-6)ELISA Kit,48T/96T  

          替卡西林鈉標(biāo)準(zhǔn)品大鼠β2微球蛋白(BMG/β2-MG)ELISA Kit,48T/96T

          泰妙菌素相關(guān)物質(zhì)A標(biāo)準(zhǔn)品大鼠熱休克蛋白47(HSP47)ELISA Kit,48T/96T

          泰妙菌素標(biāo)準(zhǔn)品犬結(jié)蛋白(Des)ELISA Kit,48T/96T CD24  CD24抗體鹽酸萘唑啉

          CD239  B細(xì)胞粘附分子CD239抗體阿司匹林

          CD23/Fc EpsilonR II  CD23抗體氨苯砜

          CD229/SLAMF3  CD229抗體煙酰胺

          CD226/DNAM-1  CD226抗體鹽酸吡哆辛

          CD22/BLCAM  B淋巴細(xì)胞粘附分子CD22抗體阿替洛爾

          CD21/EBV receptor  2型補(bǔ)體受體抗體倍他米松

          CD200R/Orexin receptor  丘腦分泌素受體抗體(食欲素受體)酸倍米松

          CD200/MOX1  膜糖蛋白CD200抗體茶苯海明

          CD20  CD20抗體茶堿

          CD20  CD20抗體醋酸地塞米松

          CD2  CD2抗體醋酸可的松

          CD1a/Cortical thymocyte antigen CD1A  T淋巴細(xì)胞CD1抗體醋酸潑尼松龍

          CD1A  T淋巴細(xì)胞CD1A抗體醋酸曲安奈德

          CD19  CD19抗體達(dá)那唑

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