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產(chǎn)品簡介
中華枝睪吸蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒是即用型PCR試劑盒的改良產(chǎn)品， 含有Taq DNA 聚合酶、dNTPs、MgCl2、反應(yīng)緩沖液、PCR 增強劑、上樣染料等所有PCR 所需要的成分，用戶只需加入模板和引物即可進行PCR 反應(yīng)，具有廣泛的用途。
詳細介紹
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Clonorchis sinensis |
貨號 | CP934074 |
產(chǎn)品特征:
中華枝睪吸蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒靈敏度高：能對低拷貝或多樣性模板進行定量。
特異性強：采用熱啟動酶的激活機制，抑制非特異性擴增 。
重復(fù)性好：擴增曲線重合度高，受干擾影響少。
擴增效率高：擴增曲線Ct值低，起峰快，效率高。
原理:
所謂實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。產(chǎn)品僅用于科研
檢測方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。
熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝螅?℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
以下是中華枝睪吸蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：
2,3-二氟-4-苯胺藍色熒光染色體核型分析試盒
2-苯烯免疫熒光細胞流式儀分析試盒
2,6-二基動物細胞/組織線粒體粗提分離試盒
氧基亞基二腈動物細胞/組織活性線粒體分離試盒
[4-(四吡喃-2-基)氧基]苯硼酸動物細胞/組織高質(zhì)純化線粒體分離試盒
2,3,5-三氟苯酸動物硬組織線粒體粗提分離試盒
正胺鹽酸鹽動物硬組織活性線粒體分離試盒
(2R,4S)-N-BOC-4-氟-D-脯氨酸動物硬組織高質(zhì)純化線粒體分離試盒
氘代硫酸純化線粒體內(nèi)膜功能/膜電位測定試盒
四雙酚 A 雙(二基)醚活體細胞線粒體內(nèi)膜功能/膜電位測定試盒
6-巰基嘌呤*線粒體內(nèi)膜功能/膜電位測定試盒
3--5-三氟基苯酚活體組織線粒體內(nèi)膜功能/膜電位測定試盒
N-BOC-D-苯氨醛真菌/酵母細胞線粒體內(nèi)膜功能/膜電位測定試盒
5-喹哪啶冰凍切片線粒體內(nèi)膜功能/膜電位測定試盒
9,9-雙(4-氨基苯基)芴線粒體外膜功能檢測試盒ANGPTL1/Angiopoietin 1/ANG-1 血管生成素-1抗體山麥冬
ANGPT3/ANG3/ANGPT4/ANG4 血管生成素3/血管生成素4抗體山藥
ANGL2/ANGPTL2 血管生成素樣蛋白2抗體山楂（山里紅）
中華枝睪吸蟲探針法熒光定量PCR檢測試劑盒Angiotensin III 血管緊張素III抗體天冬
Angiotensin II type 1A receptor 血管緊張素Ⅱ1A型受體抗體毛冬青
Angiotensin II 血管緊張素Ⅱ抗體巴豆
Angiotensin I/Angiotensinogen 血管緊張素I抗體半邊蓮
Angiopoietin 2/ANG2 血管生成素2抗體白屈菜
Angiomotin 血管抑素結(jié)合蛋白抗體白果
ANGEL2 ANGEL2蛋白抗體白茅根
ANGEL1 ANGEL1蛋白抗體江南卷柏
Anei-ATX/Autotaxin 自分泌運動因子抗體地膽草
Androgen receptor 雄激素受體抗體地膚子
ANAPC1 細胞周期末期促進復(fù)合蛋白APC1抗體蘆薈（好望角蘆薈）
Amylin 糖尿病相關(guān)肽/胰島淀粉樣肽抗體芥子
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
具有下列特點：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結(jié)果。產(chǎn)品僅用于科研