化工儀器網(wǎng)
產(chǎn)品簡介
魯氏不動桿菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒所謂實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。
詳細介紹
產(chǎn)品名稱 | |
英文名稱 | Acinetobacter lwoffi |
貨號 | CP933849 |
產(chǎn)品特征:
魯氏不動桿菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒靈敏度高：能對低拷貝或多樣性模板進行定量。
特異性強：采用熱啟動酶的激活機制，抑制非特異性擴增 。
重復(fù)性好：擴增曲線重合度高，受干擾影響少。
擴增效率高：擴增曲線Ct值低，起峰快，效率高。
原理:
所謂實時熒光定量PCR技術(shù)，是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，后通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。產(chǎn)品僅用于科研
檢測方法：
1.Ⅰ法：
在PCR反應(yīng)體系中，加入過量SYBR熒光染料，SYBR熒光染料特異性地摻入DNA雙鏈后，發(fā)射熒光信號，而不摻入鏈中的SYBR染料分子不會發(fā)射任何熒光信號，從而保證熒光信號的增加與PCR產(chǎn)物的增加*同步。
定量PCR擴增熒光曲線圖
PCR產(chǎn)物熔解曲線圖
2.TaqMan探針法：
探針完整時，報告基團發(fā)射的熒光信號被淬滅基團吸收；PCR擴增時，Taq酶的5’-3’外切酶活性將探針酶切降解，使報告熒光基團和淬滅熒光基團分離，從而熒光監(jiān)測系統(tǒng)可接收到熒光信號，即每擴增一條DNA鏈，就有一個熒光分子形成，實現(xiàn)了熒光信號的累積與PCR產(chǎn)物的形成*同步。
熒光定量PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
以下是魯氏不動桿菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒的相關(guān)產(chǎn)品：
氟喹諾酮類快速檢測卡大鼠粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA Kit，48T/96T
己烯雌酚快速檢測卡人糖蛋白130(gp130)ELISA Kit，48T/96T
氟喹諾酮總量檢測卡小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA Kit，48T/96T
磺胺類多殘留檢測卡大鼠糖蛋白130(gp130)ELISA Kit，48T/96T
黃曲素B1快速檢測卡 豚鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISA Kit，48T/96T
黃曲素M1快速檢測卡 人肝細胞生長因子(HGF)ELISA Kit，48T/96T
青霉素快速檢測試紙卡 小鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISA Kit，48T/96T
β內(nèi)酰胺類快速檢測試紙卡 豬肝細胞生長因子(HGF)ELISA Kit，48T/96T
紅霉素快速檢測試紙卡 大鼠肝細胞生長因子(HGF)ELISA Kit，48T/96T
新霉素快速檢測試紙卡 兔子肝細胞生長因子(HGF)ELISA Kit，48T/96T
頭孢噻呋快速檢測試紙卡 犬細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA Kit，48T/96T
蔬菜農(nóng)藥速測卡人細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA Kit，48T/96T
茶葉農(nóng)藥速測卡小鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA Kit，48T/96T
糧食農(nóng)藥速測卡
魯氏不動桿菌探針法熒光定量PCR檢測試劑盒大鼠細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA Kit，48T/96T
蔬菜農(nóng)藥檢測卡兔子細胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)ELISA Kit，48T/96T Histone H3 (tri methyl K36) 三基化組蛋白H3抗體柴胡皂苷C
Histone H3 (mono methyl K79) 單基組蛋白H3K9抗體柴胡皂苷D
Histone H3 (Di Methyl K9) 二基化組蛋白H3K9抗體柴胡皂苷B1
Histone H3 (Di Methyl K4) 二基化組蛋白H3K4抗體柴胡皂苷B2
Histone H3 (Di Methyl K36) 二基化組蛋白H3抗體土貝母苷
Histone H3 (Di Methyl K27) 三基化組蛋白H3抗體牛蒡子苷
Histone H3 組蛋白H3抗體靛藍
Histone H2B 組蛋白H2B抗體黃柏酮
Histone H2A.Z/ H2AFZ 組蛋白H2AZ抗體吳茱萸堿
Histone H2A.x 組蛋白H2AX抗體吳茱萸次堿
Histone H2A 組蛋白H2A抗體松脂醇二葡萄糖苷
Histone H1 組蛋白H1抗體2,3,5,4-四羥基二苯烯葡萄糖苷
HIST1H2AH 組蛋白H2A/S抗體貝母素
His tag(CT) 聚組氨酸抗體g標簽抗體（C端）貝母素
His tag(2D5) 小鼠抗聚組氨酸單克隆抗體連翹苷
需要自備的器材：
1．儀器：分析天平、離心機、熒光 PCR 擴增儀、組織研磨器、-20 ℃冰箱、可調(diào)移液器（2 µL、20µL、200 µL、1000 µL）。
2．耗材：熒光 PCR 反應(yīng)管、眼科剪、眼科鑷、生理鹽水、1.5 mL 經(jīng)焦碳酸二乙酯（DEPC）水
處理的滅菌離心管、吸頭（10 µL、200 µL、1000 µL）、滅菌雙蒸水。
具有下列特點：
1.即開即用，用戶只需要提供樣品 DNA 模板，操作簡單，定量準確快速。
2. 引物經(jīng)過優(yōu)化，特異性強。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 560 bp。
3. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。
4. 提供陽性對照，便于分析試驗結(jié)果。產(chǎn)品僅用于科研