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          小鼠子宮平滑肌細(xì)胞提取物

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          • 所在地 上海市

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          更新時(shí)間:2020-07-06 10:02:13瀏覽次數(shù):547

          聯(lián)系我們時(shí)請說明是化工儀器網(wǎng)上看到的信息,謝謝!

          產(chǎn)品簡介

          CAS 詳見說明書 純度 詳見說明書
          分子量 詳見說明書 分子式 詳見說明書
          供貨周期 現(xiàn)貨 規(guī)格 詳見說明書
          貨號 CS-X3688 應(yīng)用領(lǐng)域 化工
          主要用途 公司產(chǎn)品僅用于科研    
          小鼠子宮平滑肌細(xì)胞提取物采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。

          詳細(xì)介紹

          細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
          1.研究的對象是活細(xì)胞
          在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
          2.研究條件可以人為控制pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
          3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
          4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備  記錄方式可采用攝影照片、縮時(shí)電影、電視等多種手段。
          5.研究的范圍比較廣泛應(yīng)用的學(xué)科領(lǐng)域較為寬廣,如細(xì)胞學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、生物化學(xué)、遺傳學(xué)、分子生物學(xué)等; 適用的對象范圍廣,從低等動物到高等動物,一種動物的不同年齡階段以及不同組織,都可進(jìn)行有針對性的研究。
          6.研究的費(fèi)用相對較經(jīng)濟(jì)可提供大量、同一時(shí)期、重復(fù)性好的、生物學(xué)性狀相似的實(shí)驗(yàn)對象。

          小鼠子宮平滑肌細(xì)胞提取物是從小鼠原代子宮平滑肌細(xì)胞提取的,小鼠原代子宮平滑肌細(xì)胞從正常小鼠子宮組織制備。所有的產(chǎn)品在發(fā)貨之前均經(jīng)過嚴(yán)格的QA/QC流程以確保其質(zhì)量。這些產(chǎn)品可以直接用于基因克隆,表達(dá)圖譜分析以及各種分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)的研究。
          總RNA制備:利用Qiagen RNeasy Kit的Trizol試劑分離RNA,然后用Qiagen RNA Clean Kit進(jìn)行純化。公司提供的總RNA樣品附有RNA樣品總濃度、總含量、電泳照片、OD值測定結(jié)果等。

          cDNA制備:純化后的總RNA來合成cDNA鏈,以50ul總反應(yīng)體系進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄,體系中包括MMLV反轉(zhuǎn)錄酶和隨機(jī)引物以及10mg總RNA。68℃反應(yīng)10min 后終止RT反應(yīng)。利用1x RT Buffer 運(yùn)輸cDNA,1 ul cDNA 足夠做一次PCR反應(yīng)。所有cDNA產(chǎn)品在訂單發(fā)貨之前都經(jīng)過了嚴(yán)格的QA/QC分析,保證了產(chǎn)品的質(zhì)量。

          蛋白制備:利用改良型RIPA Buffer (50mMTris, pH7.2, 150mM NaCl, 1mM EDTA, 1mM EGTA, 1% NP-40 , 1mM Na3VO4, 5mM NaF, 400uM PMSF, 1ug/ml of Pepstatin A, 5ug/ml of Aprotinin, 5ug/ml of Leupeptin)制備小鼠子宮平滑肌組織裂解液,離心去除組織碎片,通過Bio-Rad蛋白檢測試劑盒測定蛋白濃度,組織蛋白稀釋后用非還原蛋白Buffer (50 mM Tris-HCl, pH 6.8, 5% Glycerol, 1% SDS, 0.002% Bromphenol Blue)添加5%β-巰基乙醇及PMSF,-80度保存。

          潛在的應(yīng)用: <1>已知基因的PCR克??;<2>mRNA選擇性剪接;<3>基因克隆與目標(biāo)測序;<4> Western and Northern Blot;<5>蛋白檢測與蛋白質(zhì)組學(xué);<6>芯片研究與表達(dá)圖譜。

           產(chǎn)品名稱

          英文名稱

          貨號

           小鼠子宮平滑肌細(xì)胞提取物

          Mouse Uterus: Normal Uterus Derivatives

          CS-X3688

           

          培養(yǎng)步驟:
          一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備:
          1)準(zhǔn)備MEM培養(yǎng)基(MEM:GIBCO,貨號11095-080),85%;北美胎牛血清(United States,GIBCO,貨號16000-044),15%。
          2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
          3)凍存液:90%*培養(yǎng)基,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。
          二.細(xì)胞處理:
          1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入10cm皿中,加入約8ml培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
          2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
          對于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
          1.棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。
          2.加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
          3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
          4.將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
          3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。貼壁細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細(xì)胞變圓脫落后,加入約1ml含血清的培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進(jìn)行凍存。
          ?以下是公司正在銷售的相關(guān)產(chǎn)品: 

          37.5pg/ml巨噬細(xì)胞清道夫受體1(MSR1)檢測試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)PFOI

          18.75ng/ml主要性蛋白(MBP)檢測試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)FSPBI (BFAI)

          0.094ng/ml黑素瘤細(xì)胞黏附分子(MCAM)檢測試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)FSPBI (BFAI)

          0.75ng/ml載脂蛋白A4(APOA4)檢測試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)I-SCEI

          9.375pg/ml上皮型脂肪結(jié)合蛋白(FABP5)檢測試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)PFEI (TFII)

          0.094ng/ml整合素β6(ITGβ6)檢測試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)SSII (ACII)

          3.75pg/ml膜聯(lián)蛋白A1(ANXA1)檢測試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)FAQI (BSMFI)

          9.375pg/ml嘌呤能受體P2X7(P2RX7)檢測試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)SFII

          9.375pg/ml絲聚蛋白(FLG)檢測試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)HIN1II (NLAIII)

          9.375pg/mlHtrA絲氨肽酶1(HTRA1)檢測試盒(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)BAUI (BSSSI)
          小鼠子宮平滑肌細(xì)胞提取物蛋白激酶Cγ(PKCγ)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)三氯叔醇(標(biāo)準(zhǔn)品)

          抗氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)間酚(標(biāo)準(zhǔn)品)

          凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)苯并(b)熒蒽標(biāo)準(zhǔn)溶液(5μg/mL,基體:醇)

          凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)苯并(k)熒蒽標(biāo)準(zhǔn)溶液(4.38ug/ml,基體:醇)

          凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體1(LOX1)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)4--3-氯苯胺(標(biāo)準(zhǔn)品)

          速激肽受體2(TACR2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)4--3-氯苯胺(98%)

          促性腺激素釋放激素(GnRH)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)基羥基茴香醚(BHA)(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99%(GC))

          GATA結(jié)合蛋白2(GATA2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)2,3-二(標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.0%(GC))

          GATA結(jié)合蛋白2(GATA2)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)基叔基醚(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.95%(GC))

          蛋白激酶抑制因子β(PKIβ)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)(標(biāo)準(zhǔn)品)

          蛋白激酶抑制因子β(PKIβ)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)苯(標(biāo)準(zhǔn)品)

          解整合素金屬蛋白酶8(ADAM8)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)苯標(biāo)準(zhǔn)溶液(506ug/ml,溶:醇)

          解整合素金屬蛋白酶8(ADAM8)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)正基苯(分析標(biāo)準(zhǔn)品,≥99.8%(GC))

          解整合素金屬蛋白酶8(ADAM8)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)烯酯(BA)(分析標(biāo)準(zhǔn)品,>99.5%(GC))

          淀粉酶β(Amyβ)檢測試盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法)對苯酚(標(biāo)準(zhǔn)品)


          細(xì)胞分類:

          一種:
          是凍存產(chǎn)品,由氮直液接拿出,干冰運(yùn)輸給客戶。一般不推薦這種,也較少使用這種方式,因?yàn)閺?fù)蘇手法對于細(xì)胞狀態(tài)影響較大,一旦細(xì)胞狀態(tài)不好,很難說是細(xì)胞自身不行,還是復(fù)蘇沒操作好;另外溫度對細(xì)胞、基因功能狀態(tài)影響很大,也不是細(xì)胞儲存的方式,快遞時(shí)間也很難控制,多種因素影響產(chǎn)品的質(zhì)量;干冰運(yùn)輸需要額外添加400元的運(yùn)費(fèi)(順豐)。
          第二種:
          是我們復(fù)蘇好細(xì)胞,QC通過后,T-25灌滿培養(yǎng)基常溫運(yùn)輸給客戶,排除復(fù)蘇造成影響,常溫運(yùn)輸也對細(xì)胞影響也不大,只需加25元運(yùn)費(fèi)(順豐)。
          質(zhì)量保證:我們的細(xì)胞株來源于ATCC、ECACC、DSMZ、JCRB等,購買到貨后,由我們實(shí)驗(yàn)室擴(kuò)增、凍存,凍存的產(chǎn)品全部經(jīng)過QC檢測,進(jìn)口來源,保證5代以內(nèi),活力>95%,無細(xì)菌、真菌、支原體污染。

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