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Celetrix電轉(zhuǎn)儀操作步驟介紹
閱讀：3150 發(fā)布時間：2021-4-21
Celetrix電轉(zhuǎn)儀適用所有真核細胞；可以電轉(zhuǎn)DNA、RNA、siRNA、蛋白質(zhì)等。擁有示波器功能，顯示實際通過樣品的電流波形，可視化掌控實驗質(zhì)量。電脈沖參數(shù)設定方便，內(nèi)部電路反應迅速，設定完成即可啟動，瞬間完成電轉(zhuǎn)。
操作步驟：
1、懸浮細胞（貼壁細胞先消化成單細胞狀態(tài)）1000rpm離心3min。
2、無血清細胞培養(yǎng)液洗一遍、1000rpm離心1min。
3、重懸細胞在電轉(zhuǎn)液中，加入DNA，將細胞轉(zhuǎn)移至電擊管蓋好并放入儀器中。
4、設定參數(shù)進行電擊，大部分細胞系可以使用30ms單脈沖，只需改變一個電壓參數(shù)。
5、取出細胞進行培養(yǎng)。
細胞電轉(zhuǎn)效率影響因素：
1.實驗操作細節(jié)很關鍵，具體操作中注意混勻的時候切勿產(chǎn)生氣泡；加質(zhì)粒的時候槍頭液體務必打干凈，勿殘留液體；吹打不能太用力，避免細胞損傷；細胞量必須達到電轉(zhuǎn)的細胞數(shù)量要求；細胞吹散；上清吸干凈，體積準確。
2.細胞本身的性質(zhì)，分子的性質(zhì)，直徑的大小和均勻度是影響實驗結果的關鍵因素，選擇合適的電轉(zhuǎn)時機很重要。
3.電轉(zhuǎn)樣品容器的選擇也很關鍵，選擇一個密閉的承壓容器，可以有效的減免氣泡對電轉(zhuǎn)的負面影響。
4.使用專門的電轉(zhuǎn)液能更加有效的提高電轉(zhuǎn)效率。