化工儀器網(wǎng)
技術(shù)文章
原位末端凋亡（TUNEL)實(shí)驗(yàn)科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹
閱讀：28 發(fā)布時(shí)間：2024-10-16原位末端凋亡（TUNEL)實(shí)驗(yàn)
一、實(shí)驗(yàn)介紹
TUNEL技術(shù)可對組織或細(xì)胞中凋亡小體或單個(gè)凋亡細(xì)胞進(jìn)行染色，能準(zhǔn)確反映細(xì)胞凋亡最典型的生物化學(xué)和形態(tài)特征。
凋亡細(xì)胞內(nèi)內(nèi)源性核酸內(nèi)切酶被激活而將自身染色體DNA切斷成缺口或3-OH末端片段這一特點(diǎn),利用脫氧核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶將標(biāo)有標(biāo)記物(如di高辛,生物素或熒光素)的脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移到3-OH末端,再用免疫組化法或免疫熒光檢測凋亡細(xì)胞。
二、特點(diǎn)及適用范圍
組織學(xué)、胚胎學(xué)、生物學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研。
三、TUNEL細(xì)胞凋亡檢測實(shí)驗(yàn)步驟
?。晒猓┙M織脫水-組織透明-浸蠟-包埋-切片和烤片-切片脫蠟-蛋白酶K修復(fù)-破膜通透-孵育tunel反應(yīng)液-DAPI染核-抗熒光素淬滅劑封片-鏡檢拍照
（白光）組織脫水-組織透明-浸蠟-包埋-切片和烤片-切片脫蠟-蛋白酶K修復(fù)--破膜通透-孵育tunel反應(yīng)液-孵育Streptavidin-HRP反應(yīng)液-DAB顯色-蘇木素染核-脫水封片-鏡檢拍照
四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果展示
五、送樣運(yùn)輸要求：
樣本放置于5倍樣本體積的4%多聚甲醛固定液中固定24h以上，常溫運(yùn)輸送樣。切勿固定時(shí)間過長，切勿冷凍結(jié)冰。