技術(shù)文章
基因提取科研實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)介紹
閱讀:35 發(fā)布時(shí)間:2024-9-20
應(yīng)用簡(jiǎn)介
DNA是遺傳信息的載體,是最重要的生物信息分子,是分子生物學(xué)研究的主要對(duì)象,因此DNA取方面的工作,那就根本談不上進(jìn)行分子生物學(xué)方面的實(shí)驗(yàn)。
在DNA提取過(guò)程中應(yīng)做到:1、根據(jù)不同研究需要,保證結(jié)構(gòu)的相應(yīng)完整性;2、盡量排除其它大分子成分的污染(蛋白質(zhì)、多糖及RNA等);3、保證提取樣品中不含對(duì)酶有抑制作用的有機(jī)溶劑及高濃度的金屬離子。下面結(jié)合不同的研究對(duì)象列出幾種相應(yīng)的DNA提取方法。
技術(shù)原理
原核生物的基因是連續(xù)不間隔的,直接用限制酶從DNA切取就可得到目的基因,再PCR擴(kuò)增后就能得到大量目的基因。
真核細(xì)胞核基因組DNA編碼的基因,以及感染真核細(xì)胞的DNA病毒和反轉(zhuǎn)錄病毒基因組編碼基因,統(tǒng)稱(chēng)真核基因。真核基因調(diào)取是指通以動(dòng)物組織或細(xì)胞為模板,提取獲得cDNA或gDNA,從中擴(kuò)增基因或啟動(dòng)子等功能元件。也可將基因片段或者各功能元件片段亞克隆至各載體。
實(shí)驗(yàn)方法
1、原核流程
送樣注意事宜
1、DNA樣品保存在TEbuffer或超純水中,并置于1.5mL或2.0mL的滅菌不黏管內(nèi),并用封口膜封好。管上用記號(hào)筆或標(biāo)簽清晰、準(zhǔn)確地標(biāo)記樣品名稱(chēng)。
2、為確保實(shí)驗(yàn)的順利,建議樣品備份1~2份,避免部分樣品降解導(dǎo)致重新取材、制備或送樣,耽誤時(shí)間。
3、所有樣品必須附帶一份《樣品信息單》,詳細(xì)填寫(xiě)信息單上所要求的各項(xiàng)樣品信息,包括樣品編號(hào)、樣品狀態(tài)(DNA液體、干粉或組織葉片、血液、肌肉等)、是否可以用完,如果是DNA液體,還需標(biāo)注濃度、體積、制備時(shí)間、電泳圖等,隨同樣品一起寄出,并將電子版發(fā)送至銷(xiāo)售人員郵箱。
4、盡量使用干冰運(yùn)輸,夏季運(yùn)輸需要適當(dāng)增加用量;