ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。
試劑盒種類多樣,那么你怎么在眾多試劑盒中區(qū)別真假試劑盒呢?
購買前:
1.選擇正規(guī)公司進口試劑盒盡量選擇大公司;國產(chǎn)試劑盒一定要選擇大型正規(guī)企業(yè),這個反映的不僅是產(chǎn)品質(zhì)量的問題,對供應(yīng)商的售前售后服務(wù)也是一個非常嚴(yán)格的檢驗。
2.產(chǎn)品的文獻引用特別是高質(zhì)量的SCI文章的引用是很多用戶都關(guān)心的問題,這是業(yè)界對產(chǎn)品認可的一個非常重要指標(biāo),而且對相關(guān)用戶的科研有一定的借鑒作用。
3. 過硬的冷鏈物流體系
目前冷鏈物流體系已經(jīng)非常成熟,各家供應(yīng)商一般都能保證抗體的低溫運輸。對于供應(yīng)商而言,主要是舍得投入,好的抗體供應(yīng)商在抗體收到后,一般冰盒還能堅持2-3天,足以讓使用者安心實驗。
4. 正規(guī)的銷售(直銷/分銷)渠道
在國內(nèi),銷售渠道是問題突出的關(guān)鍵環(huán)節(jié),尤以假抗體試劑為甚,很多產(chǎn)品在包裝上其實是可以辨別的(科研工作者很少關(guān)注,往往以價格為導(dǎo)向)。在利益的驅(qū)使下,部分經(jīng)銷商經(jīng)常會自己制作抗體試劑,貼上假標(biāo)簽以次充好;另一個很普遍的現(xiàn)象是從正規(guī)渠道購得抗體試劑,通過小作坊稀釋分裝后,再出售給科研工作者。無論是以次充好,還是稀釋分裝,都會給科研工作者都帶來很多實驗風(fēng)險。
5. 不常見指標(biāo)的選擇如需檢測不常見物種的樣本(如禽類、豬、羊等),可選擇靠譜的生物網(wǎng)站或ELISA試劑盒供應(yīng)商。其實,“貨比三家”有時會有一些“驚喜”,也許你會發(fā)現(xiàn):某個公司的說明書除了指標(biāo)名稱不一致,其他內(nèi)容基本一樣;某個指標(biāo),幾家公司試劑盒的性能參數(shù)*一樣…一定要記?。宏P(guān)于網(wǎng)上宣傳有所有種屬所有指標(biāo)ELISA試劑盒的公司,那真的是再謹(jǐn)慎也不為過。
6. 所有指標(biāo)常備現(xiàn)貨抗體并不十分穩(wěn)定,針對非熱門研究指標(biāo),廠家為保證產(chǎn)品質(zhì)量通常不會長期備現(xiàn)貨,若承諾相對冷門的ELISA試劑盒能隨時發(fā)貨,那需謹(jǐn)慎考慮是否要選擇該供應(yīng)商。
購買后:
1.檢查檢查說明書、包裝盒的質(zhì)量,通常假偽劣產(chǎn)品為了降低成本,印刷的質(zhì)量會比較差。其次仔細閱讀說明書,查找ELISA的性能指標(biāo)。
2.交叉實驗鑒別
如果購買了兩盒同一公司的ELISA試劑盒A和B,利用交叉實驗即可鑒別ELISA試劑盒是否造假,方法如下:
(1) 取出購買的試劑盒A的包被板兩條。
(2) 一條包被板加試劑盒A的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(3) 另一條包被板加試劑盒B的標(biāo)準(zhǔn)品做標(biāo)準(zhǔn)曲線。
(4) 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物。
(5) 實驗完畢后,檢測兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的同一個指標(biāo)而非A和B,即該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
(6) 如果兩條標(biāo)準(zhǔn)曲線不一致則說明兩個ELISA試劑盒檢測的不同指標(biāo),試劑盒A只能檢測A,不能檢測B,即該試劑盒為正常的ELISA試劑盒。
3.干擾實驗鑒別
利用干擾實驗即可鑒別ELISA試劑盒是否檢測目的抗原,方法如下:
(1) 將針對試劑盒特異性的重組蛋白抗原和試劑盒中的檢測抗體配置成antibody: antigen= 1:2的混合孵育液
(2) 37℃孵育15分鐘后,代替原試劑盒中的檢測抗體
(3) 后續(xù)操作按照試劑盒說明書進行,加檢測抗體、酶復(fù)合物和底物
(4) 實驗完畢后,檢測其標(biāo)準(zhǔn)曲線,如果標(biāo)準(zhǔn)曲線良好則說明加入的目的抗原和試劑盒抗體不匹配,試劑盒檢測抗體針對的是非目的抗原,該試劑盒為偽劣假造ELISA試劑盒。
(5) 如果標(biāo)準(zhǔn)曲線無線性,則說明試劑盒檢測抗體已被目的抗原中和或干擾,影響了其實際試劑盒抗體的檢測作用,則該試劑盒檢測抗體針對的是目的抗原。