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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
免疫組化1、 石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ15min-二甲苯Ⅱ15min-無(wú)水乙醇Ⅰ5min-無(wú)水乙醇Ⅱ5min-85%酒精5min-75%酒精5min-蒸餾水洗。
詳細(xì)介紹
石蠟切片免疫組化
實(shí)驗(yàn)步驟
1、 石蠟切片脫蠟至水：依次將切片放入二甲苯Ⅰ15min-二甲苯Ⅱ15min-無(wú)水乙醇Ⅰ5min-無(wú)水乙醇Ⅱ5min-85%酒精5min-75%酒精5min-蒸餾水洗。
2、 抗原修復(fù)：組織切片置于盛滿EDTA抗原修復(fù)緩沖液（PH9.0）的修復(fù)盒中于微波爐內(nèi)進(jìn)行抗原修復(fù)，中火8min至沸，?；?min保溫再轉(zhuǎn)中低火7min，此過(guò)程中應(yīng)防止緩沖液過(guò)度蒸發(fā)，切勿干片。自然冷卻后將玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次，每次5min。
3、 阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶：切片放入3%過(guò)氧化氫溶液（雙氧水：純水=1:9），室溫避光孵育25 min，將玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次，每次5min。
4、 BSA或者血清封閉:切片稍甩干后用組化筆在組織周圍畫(huà)圈（防止抗體流走），在圈內(nèi)滴加用3%BSA或者10%正常兔血清均勻覆蓋組織，室溫封閉30min。（一抗是山羊來(lái)源用10%正常兔血清封閉，一抗其它來(lái)源的用3%BSA封閉）
5、 加一抗：輕輕甩掉封閉液，在切片上滴加PBS按一定比例配好的一抗，切片平放于濕盒內(nèi)4°C孵育過(guò)夜。（濕盒內(nèi)加少量水防止抗體蒸發(fā)）
6、 加二抗：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加與一抗相應(yīng)種屬的二抗（HRP標(biāo)記）覆蓋組織，室溫孵育50min。
7、 DAB顯色：玻片置于PBS（PH7.4）中在脫色搖床上晃動(dòng)洗滌3次，每次5min。切片稍甩干后在圈內(nèi)滴加新鮮配制的DAB顯色液，顯微鏡下控制顯色時(shí)間，陽(yáng)性為棕黃色，自來(lái)水沖洗切片終止顯色。
8、 復(fù)染細(xì)胞核：Harris蘇木素復(fù)染3min左右，自來(lái)水洗，1%的鹽酸酒精分化數(shù)秒，自來(lái)水沖洗，氨水返藍(lán)，流水沖洗。
9、 脫水封片：將切片依次放入75%酒精6min-85%酒精6min --無(wú)水乙醇Ⅰ6min -無(wú)水乙醇Ⅱ6min -二甲苯Ⅰ5min 中脫水透明，將切片從二甲苯拿出來(lái)稍晾干，中性樹(shù)膠封片。
10、 顯微鏡鏡檢，圖像采集分析。
茁彩生物（zcibio）專注于各種生物制劑、標(biāo)準(zhǔn)品、API及化合物庫(kù)，總部位于中國(guó)上海，分別在國(guó)內(nèi)各個(gè)省份設(shè)置代理商。Zcibio經(jīng)過(guò)不斷努力已經(jīng)研究出更多產(chǎn)品，包括旗下的流式抗體，分子生物學(xué)試劑，以及WB輔助試劑， 產(chǎn)品涵蓋癌癥、神經(jīng)科學(xué)、抗感染、表觀遺傳學(xué)等20個(gè)熱門(mén)研究領(lǐng)域。同時(shí)zcibio還擴(kuò)大了市場(chǎng)的外包服務(wù)，其中包括常用的HE然后，病例切片，免疫組化以及TUNEL檢測(cè)，項(xiàng)目超過(guò)20種不同類型的試驗(yàn)，可滿足實(shí)驗(yàn)室絕大多數(shù)的項(xiàng)目要求。
