723分光光度計(jì)是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜,來(lái)研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。分光光度計(jì)可在紫外可見(jiàn)光區(qū)任意選擇不同波長(zhǎng)的光。物質(zhì)的吸收光譜就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(zhǎng)的光能量,相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的結(jié)果。
暗電流是光電檢測(cè)器的一種特殊產(chǎn)物,無(wú)論是光電管(電子流)還是硅光二極管(價(jià)電子移動(dòng))只要處于通電狀態(tài)均會(huì)產(chǎn)生暗電流;嚴(yán)格意義上講,由于分光光度計(jì)的光信號(hào)檢測(cè)系統(tǒng)(光電轉(zhuǎn)換器)不僅有光電檢測(cè)器同時(shí)還包括放大電路,因此放大系統(tǒng)對(duì)暗電流的大小、漂移及噪聲的影響也不可小視。
723分光光度計(jì)暗電流對(duì)分析結(jié)果的影響:
對(duì)于分光光度計(jì)假如被測(cè)樣品的透過(guò)(或反射)光信號(hào)到達(dá)光電檢測(cè)器后與檢測(cè)器本身的暗電流信號(hào)疊加在一起被放大處理,其測(cè)試結(jié)果的可信度和真實(shí)性就會(huì)大打折扣;實(shí)踐證實(shí),尤其在雙光束雙檢測(cè)器類型的儀器上,假如不進(jìn)行暗電流的校正,有時(shí)結(jié)果值與真實(shí)值相差甚遠(yuǎn)。
分光光度計(jì)的暗電流校正與樣品背景扣除的熟悉誤區(qū):
在分光光度計(jì)的應(yīng)用上,人們?cè)缫咽煜さ綐悠繁尘皩?duì)分析結(jié)果的影響,為了得到真實(shí)的光譜(校正光譜)雙光束分光光度計(jì)儀器應(yīng)運(yùn)而生。使用者在測(cè)定前在兩個(gè)通道上均放進(jìn)空缺液或參比液,在單波長(zhǎng)方式下僅按調(diào)零鍵即可,假如是做波長(zhǎng)掃描則要做基線記憶或稱為基線校正,其目的就是做背景扣除。但有些儀器使用者對(duì)暗電流校正往往忽略或不了解甚至誤將背景校正看做為就是暗電流校正。