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          技術(shù)文章

          一步解決細胞培養(yǎng)板選擇困擾全程干貨

          閱讀:1206          發(fā)布時間:2020-11-30

          細胞培養(yǎng)板作為培養(yǎng)細胞的一種常用和重要的工具,形狀、規(guī)格、用途多樣,你是否也為如何選擇適合的培養(yǎng)板而迷茫?你是否正為如何方便、正確的使用培養(yǎng)板而苦惱?你對如何處理培養(yǎng)板是否也有困惑?對不同的培養(yǎng)板各有什么妙用你又有何體會?

           

          細胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U 型和V 型);培養(yǎng)孔的孔數(shù)有 6、12、24、48、96、384、1536 孔等;根據(jù)材質(zhì)的不同有 Terasaki 板和普通細胞培養(yǎng)板。具體選擇時根據(jù)培養(yǎng)細胞的類型、所需培養(yǎng)體積及不同的實驗?zāi)康亩ā?/span>

           

          平底和圓底(U型和V型)培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇

           

          不同形狀的板子自然有不同用途。平底的什么類型的細胞都可用,但當(dāng)細胞數(shù)目較少,如做克隆時,就用 96 孔平底板;另外,做 MTT 等實驗時,無論貼壁和懸浮細胞,一般均用平底板。這樣便于鏡下觀測、有明確的底面積、細胞培養(yǎng)液面高度相對一致,還便于 MTT 檢測。

           

          至于 U 或 V 型板,一般在某些特殊要求時才使用。如在免疫學(xué)方面,當(dāng)做兩種不同淋巴細胞混合培養(yǎng)時,需要二者相互接觸以刺激。因此,一般需要 U 型板,因細胞會由于重力的作用而聚集在一個很小的范圍內(nèi)。V 型板的用途更少,一般用于細胞殺傷實驗時,為了使效靶細胞緊密接觸,常使用 V 型板,但這種實驗也可用 U 型板替代(加入細胞后﹐低速離心)。除此之外,圓底還可以拿來做分析、化學(xué)反應(yīng)、同位素摻入的實驗或是保存樣品用。

           

          孔數(shù)的選擇

           

          流式一般用 6 孔,MTT 一般用 96 孔,細胞爬片一般用 24 孔等,要具體根據(jù)你的實驗來定。

           

           

          Terasaki 板和普通細胞培養(yǎng)板的區(qū)別

           

          Terasakiplate 主要是用于晶體學(xué)研究,產(chǎn)品設(shè)計便于對晶體的觀察與結(jié)構(gòu)分析。有 sitting 和 handing drop 兩種方法。兩種方法應(yīng)用產(chǎn)品的外形結(jié)構(gòu)也不同,材料上選擇 crystal class polymer,特殊的材料有利觀察晶體結(jié)構(gòu)。

           

          細胞培養(yǎng)板主要材料是 treated sufface,便于細胞貼壁生長與伸展。當(dāng)然還與浮游細胞的生長材料,降低結(jié)合表面積有關(guān),取決于實驗材料上的應(yīng)用與對材料的選擇。

           

          細胞培養(yǎng)板與酶標(biāo)板的區(qū)別

           

          用多孔細胞培養(yǎng)板測吸光度肯定可以,可以用它來做樣品的蛋白定量和 MTT 檢測。

           

          區(qū)別:酶標(biāo)板一般要比細胞培養(yǎng)板貴,細胞板主要做細胞培養(yǎng),但也可以用來測蛋白濃度;酶標(biāo)板包括包被板和反應(yīng)板,一般不能用做細胞培養(yǎng),它主要做免疫酶聯(lián)反應(yīng)后的蛋白檢測,它需要更高的要求還需要特定的酶標(biāo)工作液。

           

          常用不同培養(yǎng)板的孔底面積及推薦加液量

           

          不同孔板所加培養(yǎng)液的液面都不宜太深,一般在 2-3 mm 范圍,結(jié)合不同孔的底面積就可算出各培養(yǎng)孔的適宜加液量。若加液量過多會影響氣體(氧氣)交換,而且在搬動過程中易溢出造成污染。具體所加細胞密度依實驗的目的不同靈活掌握。

          培養(yǎng)器皿

          面積(cm2

          培養(yǎng)液量(ml)

          細胞量

          96 孔培養(yǎng)板

          0.32

          0.1

          105

          24 孔培養(yǎng)板

          2

          1.0

          5×105

          12 孔培養(yǎng)板

          4.5

          2.0

          106

          6 孔培養(yǎng)板

          9.6

          2.5

          2.5×106

          3.5 cm 培養(yǎng)皿

          8

          3.0

          2×106

          6 cm 培養(yǎng)皿

          21

          5.0

          5.2×106

          10 cm 培養(yǎng)皿

          55

          10.0

          13.7×106

          25 cm2 培養(yǎng)瓶

          25

          5.0

          5×106

          75 cm2 培養(yǎng)瓶

          75

          15~30

          2×107

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