流動相為什么要過濾呢?
*,色譜體系是一種精密的設(shè)備,對結(jié)果的精確性要求也很高,因而,因為色譜體系的精密性和對結(jié)果分析的精確性要求,對樣品的過濾顯得尤為重要。咱們在樣品制備的每步不可漫不經(jīng)心。正如液相色譜體系的說明書中所要求的,活動相得須使用HPLC的試劑,且使用前須過濾。
為什么要減壓過濾?
過濾能夠維護色譜體系和色譜柱,長柱子的使用壽命,改善數(shù)據(jù)的精度。過濾能夠消因為摩擦產(chǎn)生顆粒而引起的壓力波動和無規(guī)律的雜質(zhì)引起的基線波動。同時,過濾也能夠去活動相中的顆粒雜質(zhì),免它們對內(nèi)密封圈形成危害,或阻塞小孔管道、層析柱、線內(nèi)過濾器及維護柱。
一般活動相在上儀器前須經(jīng)過兩個步驟:減壓抽濾和超聲
減壓抽濾有兩個意圖,
一個是過濾掉氣體,尤是有機相和水相混合的時分,會產(chǎn)生很多的氣泡。這些氣泡進入儀器就會堵住儀器和色譜柱,所以要除去。
一個是過濾掉不溶性微粒。你看一般的過濾膜是4.5um孔徑的,這個是針對你的色譜柱而定的。色譜柱一般是5um的粒徑,過濾的活動相里邊小的毛絮啊,顆粒啊不會進入色譜柱。
超聲的首要意圖也是為了脫氣,另外還助令溶液混合均勻等效果。不過超聲首要是為了去掉溶劑瓶瓶壁和瓶底的氣泡,所以沒要超聲太久的時間,3-5min夠了。
總而言之,都是為了維護儀器和色譜柱,防氣泡和雜質(zhì)進入。
過濾用什么?
一般建議使用的過濾器?;蛟S有人以為,過濾裝置貌似挺貴,算了,買個砂芯漏斗得了。哎,同學,這么貴的房子都買了,還在乎一把鎖?
使用的活動相過濾器,簡單,而且全。
怎么過濾?
只需按照下圖的說明,依次放置好濾器和管線,再發(fā)動真空泵可開始過濾。
在操作過程中,有一點需要留意,須用枯燥的過濾膜和枯燥的支撐底座進行過濾,以防空氣在膜上形成氣阻,這個阻力可使液體流速下降或阻撓液體流出。在將過濾膜放在濾器上之前,須保濾器是清潔、枯燥的。