您好, 歡迎來到化工儀器網(wǎng)
分析方法的檢測限、定量限及其驗證
前言
檢測限和定量限是分析方法的重要屬性，在中國藥典2020年版分析方法驗證指導原則[1]中規(guī)定這2項是重要的驗證指標，包括定量、限度的雜質(zhì)測定需要著重考慮檢測限和定量限，且在該版本指導原則中刪除了校正因子以及其中定量限的規(guī)定。本文試圖從定義、測量方法、問題和解決方案進行簡單的討論，為分析方法驗證活動中檢測限和定量限的的開展提供一定的參考。
1、檢測限和定量限的定義
檢測限系指試樣中被測物能被檢測出的低量，定量限系指試樣中被測物能被定量測定的低量。檢測限僅作為限度試驗指標和定性鑒別的依據(jù)，沒有定量意義。而對微量或痕量藥物分析、定量測定藥物雜質(zhì)和降解產(chǎn)物時，應確定方法的定量限，需要注意的是定量限的測定結(jié)果應符合準確度和精密度要求。
2、檢測限和定量限的測量方法
檢測限和定量限的測量方法有直觀法、信噪比法、基于響應值標準偏差和標準曲線斜率法等3種方法，不同方法應用范圍有所不同[2]：
（1）直觀法主要用于非儀器方法，通過目視法觀察逐級稀釋進樣獲得非儀器方法檢出限（或定量測定）的低濃度或量。
（2）信噪比法適用于能顯示基線噪音的儀器分析方法，是通過已知低濃度的被測物的檢測信號與基線噪音比較，確定可被檢測出的小量或濃度。檢測限一般以信噪比為3:1或2:1；定量限一般以信噪比為10:1。
（3）基于響應值標準偏差和標準曲線斜率法可采用已知標準物質(zhì)與空白樣品，或已知含量的樣品在低濃度范圍按照分析步驟進行測量，通過分析相當數(shù)量的樣品（需要12~20份）計算方法的檢出限和定量測定低濃度或量，其計算公式為（公式1）：
LOD（LOQ）=3.3（或10）δ/S
式中：LOD（LOQ）：檢測限（定量限）；δ：響應值的偏差；S：標準曲線的斜率。δ可以通過下列方法測得：（1）測定空白值的標準偏差；（2）標準曲線的剩余標準偏差或是截距的標準偏差來代替。
當已知含量標準物質(zhì)為單點時，檢出限公式也可以表達如下（定量限D(zhuǎn)L公式相同，置信因子取10，公式2）：
3、檢測限和定量限的問題
由于使用上的方便性，信噪比法是目前方法驗證中的測量方法。但信噪比受檢測儀器狀態(tài)的影響很大，且與耗材、試劑、樣品前處理等多種因素相關，按信噪比3/10計算與驗證過的檢測限/定量限在下一次檢測時并不是方法的檢測限/定量限，因此導致方法驗證出現(xiàn)異常，測量的定量