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液相色譜儀使用及工作原理
閱讀：2770 發(fā)布時(shí)間：2022-8-25
工作原理：流動(dòng)相通過輸液泵流經(jīng)進(jìn)樣閥，與樣品溶液混合，流經(jīng)色譜柱，在色譜柱中進(jìn)行吸附、分離，最后每一組分分別經(jīng)過檢測器轉(zhuǎn)變?yōu)殡娪嵦枺谏V工作站上出現(xiàn)相應(yīng)的樣品峰。
液相色譜的使用：首先對樣品進(jìn)行預(yù)處理，然后進(jìn)樣，進(jìn)樣完畢后，清洗進(jìn)樣口，每次分析結(jié)束后，清洗通道，最后關(guān)閉儀器。
擴(kuò)展資料：液相色譜所用基本概念：保留值、塔板數(shù)、塔板高度、分離度、選擇性等與氣相色譜一致。液相色譜所用基本理論：塔板理論與速率方程也與氣相色譜基本一致，但由于在氣相色譜中以液體代替氣相色譜中氣體作為流動(dòng)相，而液體和氣體的性質(zhì)不相同。
此外，液相色譜所用的儀器設(shè)備和操作條件也與氣相色譜不同，所以，液相色譜與氣相色譜有一定的差別。
主要有以下幾力‘面：
?、俨僮鳁l件及應(yīng)用范圍不同
對于氣相色譜，是加溫操作。僅能分析在操作溫度下能汽化而不分解的物質(zhì)，對高沸點(diǎn)化合物、非揮發(fā)性物質(zhì)、熱不穩(wěn)定化合物、離子型化合物及高聚物的分離、分析較為困難，致使其應(yīng)用受到一定程度的限制，據(jù)統(tǒng)計(jì)只有大約20%的機(jī)物能用氣相色譜分析。
而液相色譜是常溫操作，不受樣品揮發(fā)度和熱穩(wěn)定性的限制，它非常適合相對分子量較大，難汽化，不易揮發(fā)或?qū)崦舾械奈镔|(zhì)、離子型化合物和高聚物的分離分析，大約占有機(jī)物的70%~80%。
?、谝合嗌V能完成難度較高的分離工作
a.氣相色譜的流動(dòng)相載氣是色譜惰性的，基本不參與分配平衡過程，與樣品分子無親和作用，樣品分子主要與固定相相互作用。而在液相色譜中流動(dòng)相液體也與固定相爭奪樣品分子，為提高選擇性增加了一個(gè)因素。也可選擇不同比例的兩種或兩種以上的液體做流動(dòng)相，增加分離的選擇性。
b.液相色譜固定相類型多，如離子交換色譜和排阻色譜等，作為分析時(shí)，選擇余地大；而氣相色譜并不可能。
c.液相色譜通常在室溫下操作，較低的溫度，一般有利于色譜分離條件的選擇。
?、塾捎谝后w的擴(kuò)散性比氣體的小105倍，因此，溶質(zhì)在液相中的傳質(zhì)速率慢，柱外效應(yīng)就顯得特別重要；而在氣相色譜中，由色譜柱外區(qū)域引起的擴(kuò)張可以忽略不計(jì)。
?、芤合嗌V中，制備樣品簡單，回收樣品也比較容易，而且回收是定量的，適合于大量制備，但液相色譜尚缺乏通用的檢測器，一起比較復(fù)雜，價(jià)格昂貴。在實(shí)際應(yīng)用中，這兩種技術(shù)是相互補(bǔ)充的。
綜上所述，液相色譜具有柱效高，選擇性高，靈敏性高，分析速度快，重復(fù)性好，應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)，該法已成為現(xiàn)代分析技術(shù)的主要手段之一。目前在化學(xué)，化工，醫(yī)藥，生化，環(huán)保，農(nóng)業(yè)等科學(xué)領(lǐng)域獲得廣泛的應(yīng)用。
高效液相色譜應(yīng)用非常廣泛，幾乎遍及定量定性分析的各個(gè)領(lǐng)域。
(1)分離混合物：高效液相色譜法只要求樣品能制成溶液，不受樣品揮發(fā)性的限制，流動(dòng)相可選擇的范圍寬，固定相的種類繁多，因而可以分離熱不穩(wěn)定和非揮發(fā)性的、離解的和非離解的以及各種分子量范圍的物質(zhì)。
通過與試樣預(yù)處理技術(shù)相配合，高效液相色譜法所達(dá)到的高分辨率和高靈敏度，可分離并同時(shí)測定性質(zhì)上十分相近的物質(zhì)，能夠分離復(fù)雜混合物中的微量成分。并且隨著固定相的發(fā)展，還可在充分保持生化物質(zhì)活性的條件下完成對其的分離。
(2)生化分析：由于高效液相色譜法具有高分辨率、高靈敏度、速度快、色譜柱可反復(fù)利用，流出組分易收集等優(yōu)點(diǎn)，因而被廣泛應(yīng)用到生物化學(xué)、食品分析、醫(yī)藥研究、環(huán)境分析、無機(jī)分析等各種領(lǐng)域，并已成為解決生化分析問題有前途的方法。
(3)儀器聯(lián)用：高效液相色譜儀與結(jié)構(gòu)儀器的聯(lián)用是一個(gè)重要的發(fā)展方向。高效液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)受到普遍重視，如分析氨基甲酸酯農(nóng)藥和多核芳烴等：高效液相色譜一紅外光譜聯(lián)用也發(fā)展很快，如在環(huán)境污染分析測定水中的烴類等．使環(huán)境污染分析得到新的發(fā)展。