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細胞破碎方法介紹
閱讀：2283 發(fā)布時間：2022-1-18
液體剪切壓力：
通過將樣品從高壓腔轉(zhuǎn)入到低壓腔時產(chǎn)生的快速壓力落差來破碎細胞
優(yōu)點：破碎快速有效,適合大體積細胞破碎
缺點：可導(dǎo)致樣品溫度升高(操作時需要冷卻系統(tǒng))
超聲
通過高頻率的超聲波破碎細胞粉碎
優(yōu)點：操作簡單
缺點：可導(dǎo)致樣品溫度升高,其很難通過冷卻系統(tǒng)降溫,剪切力有可能導(dǎo)致蛋白質(zhì)受損,噪音較大,破碎量較小
玻璃珠磨碎
用玻璃珠的攪動來磨碎細胞
優(yōu)點：對于很難破碎的細胞(如酵母)非常有用
缺點：有些慢且有噪音
滲透壓
從高滲透壓轉(zhuǎn)向低滲透壓介質(zhì)
優(yōu)點：操作簡便,花費低廉
缺點：僅用于外壁較脆弱的細胞(如動物細胞)
反復(fù)凍融
通過反復(fù)形成冰晶破碎細胞；通常結(jié)合酶法裂解下細胞
優(yōu)點：操作簡便,花費低廉,產(chǎn)生大量細胞膜碎片
缺點：慢,也許會損傷敏感蛋白質(zhì)或者破壞蛋白質(zhì)和細胞膜的相互作用,產(chǎn)量低
酶法裂解
常和其他技術(shù)一同使用,如反復(fù)凍融或滲透壓破碎法；溶菌酶是破碎細菌細胞壁常用的酶
優(yōu)點：溫和,可產(chǎn)生較大的細胞膜碎片
缺點：慢,產(chǎn)量低