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        1. 賽爾瑞成(北京)生命科學技術有限公司

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          CR1001-超級核酸酶(Benzonase Nuclease)
          CR1001-超級核酸酶(Benzonase Nuclease)

          地:北京

          貨物所在地:北京北京市

          更新時間:2024/11/8 21:00:07

          訪問次數(shù):150

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          供應簡介
          超級核酸酶(Benzonase Nuclease)是一種來源于粘質沙雷氏菌(Serratia marcescens,也稱靈桿菌)的非特異性核酸內切酶,也稱全能核酸酶或廣譜核酸酶。該核酸酶可在非常寬泛的條件下降解單鏈、雙鏈、線狀、環(huán)狀、天然或變性等各種形式的DNA或RNA,產生長度為3至5個堿基的5'-單磷酸寡核苷酸。


          詳細介紹

          一、產品簡介


          超級核酸酶(Benzonase Nuclease)是一種來源于粘質沙雷氏菌(Serratia marcescens,也稱靈桿菌)的非特異性核酸內切酶,也稱全能核酸酶或廣譜核酸酶。該核酸酶可在非常寬泛的條件下降解單鏈、雙鏈、線狀、環(huán)狀、天然或變性等各種形式的DNA或RNA,產生長度為3至5個堿基的5'-單磷酸寡核苷酸。


          超級核酸酶(Benzonase Nuclease)用途廣泛,可用于在重組蛋白、病毒疫苗、抗體藥物等生物制品生產過程中去除核酸,或用于降低細胞、組織、微生物等蛋白裂解液樣品的粘度等(可以用于化學破菌而省去超聲儀或高壓均質機,或者結合化學破菌大幅度減少超聲儀或高壓均質機的工作負荷)。


          本產品采用我公司自主研發(fā)的技術平臺表達、純化和制備,分子量約為52.3kDa超級核酸酶(Benzonase Nuclease)活性部分與Serratia marcescens中的天然核酸內切酶氨基酸序列*一致。


          二、產品性質

          來源

          E. coli

          分子量

          52.3 kDa

          純度

          不小于 95% SDS-PAGE

          等電點

          6.19

          酶活

          不小于 200 U/μL

          最適酶活 pH

          8.0-9.2 (工作范圍 pH 6.0-10.0

          最適酶活溫度

          37℃ (工作范圍 0℃-42℃

          最適輔助因子

          2mM Mg2+ (工作范圍 1-10 mM

          蛋白酶活性殘留

          未檢出

          保存緩沖液

          10mM Tris (pH8.0), 500mM NaCl, 2mM MgCl2, 50% 甘油

          活性單位定義

          37℃ , pH 8.0 反應條件下,在 30 min 內*消化 37 μg DNA 成為寡核苷酸的酶量(相當于使 △A260 吸收值變化 1.0 )定義為一個活性單( U )。


          三、產品用途


          1)有效去除各種重組蛋白制備過程中的核酸殘留;

          2)有效去除病毒疫苗和各種重組病毒中的核酸,以符合國家食藥監(jiān)局相關指南中關于核酸污染的要求;

          3)有效降低細胞裂解液由于大量核酸存在而導致的粘度過大,以使裂解液易于后續(xù)操作;

          4)有效降低大腸桿菌或其它工程菌裂解液粘度,大幅改善蛋白制備過程中菌體裂解液難過濾、難離心的問題,節(jié)約設備和人力成本;

          5)在某些情況下,充分去除核酸可以提高包涵體蛋白的復性率;

          6)在實時定量PCR測定重組病毒滴度時,用于去除病毒包裝細胞的核酸和包裝質粒污染;

          7)有效防止細胞成團,在細胞培養(yǎng)液中或某些細胞凍存液中加入適量超級核酸酶,可以防止細胞成團,以利于后續(xù)細胞分析和檢測。超級核酸酶沒有蛋白酶的活性殘留,本身也不會對健康細胞造成傷害,因此是防止細胞成團的理想選擇。

          8)在二維凝膠電泳(2-DE)的過程中,加入核酸酶可以提高蛋白質的分離效率和雙向電泳的分辨率。




          四、產品效果

          電泳圖.png



          五、運輸和保存方法


          低溫運輸(冰袋或干冰),-20℃保存,有效期3年。4℃保存一個月,酶活性沒有明顯變化。


          六、常見化學試劑兼容條件

          化學試劑

          最佳條件

          有效條件

          DTT

          0-100 mM

          可以大于 100 mM

          2-Mercaptoethanol

          0-100mM

          可以大于 100mM

          Triton X-100

          --

          小于 0.4%

          Urea

          --

          小于 5M

          SDS

          --

          小于 0.05%

          磷酸根離子

          0-10 mM

          0-100 mM

          單價陽離子(如 Na + , K+ , NH4 +

          0-20 mM

          0-150 mM

          (NH4)2SO4

          --

          小于 100mM


          七、使用方法示例(去除細胞裂解上清中的核酸)


          1、樣本準備

          大腸桿菌:離心收集菌體,用PBS或其它緩沖液清洗1次,8,000 rpm離心5 min,收集菌體沉淀。

          貼壁細胞:去除培養(yǎng)基,用PBS清洗細胞,去除上清。

          懸浮細胞:離心收集細胞,用PBS清洗細胞,6,000 rpm離心10 min,收集細胞沉淀。


          2、樣品處理

          將收集到的菌體或細胞沉淀按照質量(g)與體積(mL)比1:(10~20) 的比例進行裂解處理,可以在冰上或室溫通過機械或化學方法裂解細胞。


          3、酶的添加

          按照250 Units消化1 g細胞沉淀的比例添加超級核酸酶,也可以先進行預實驗自行選擇添加的酶量,在一定范圍內增加酶量,消化所需時間相應減少。


          4、上清獲取

          以12,000 rpm的轉速高速離心10-30min,去除沉淀,即獲得菌體或細胞裂解液上清,再進行后續(xù)相關實驗。



          八、注意事項

          1)若溶液為高鹽溶液,偏酸性或者偏堿性,含有較高濃度的去垢劑、變性劑,應適當增加酶的用量或延長孵育時間。盡量按照上表“常見化學試劑兼容條件"表中的濃度范圍調整待處理樣品相關試劑的濃度,以使酶活性處于最大。

          2)不建議-80oC保存本產品,也不建議反復凍融,有可能會降低產品的酶活性,可以適當分裝保存于-20oC。



          產品目錄


          貨號

          產品名稱

          規(guī)格

          目錄價格

          CR1001

          超級核酸酶

          25KU

          400

          CR1002

          超級核酸酶

          50KU

          680

          CR1003

          超級核酸酶

          100KU

          1300




          本產品僅作為科研試劑使用!

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