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訪(fǎng)問(wèn)次數(shù):64更新時(shí)間:2024-10-31 10:36:43
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干擾素 γ(IFN gamma)是一種由 T 細(xì)胞和 NK 細(xì)胞在應(yīng)對(duì)病毒感染或炎癥狀態(tài)時(shí)分泌的促炎性細(xì)胞因子。IFN gamma 在先天性和適應(yīng)性免疫中發(fā)揮著重要作用,它能促進(jìn) T 細(xì)胞分化為 TH1 細(xì)胞并促進(jìn)調(diào)節(jié)性 T 細(xì)胞(Treg)的發(fā)育,同時(shí)抑制 T 細(xì)胞分化為 TH17 細(xì)胞。它的抗腫瘤特性已被用于骨質(zhì)疏松癥的治療,并且在免疫腫瘤學(xué)中引起了極大的關(guān)注,它可以提高膀胱癌或卵巢癌患者的生存率。
對(duì)血清樣本的評(píng)估通常需要更高的靈敏度。在某些情況下,AlphaLISA 檢測(cè)可能具有足夠的靈敏度來(lái)檢測(cè)血清或血漿中的低水平分析物。
產(chǎn)品特點(diǎn)
產(chǎn)品規(guī)格:
檢測(cè)點(diǎn)數(shù):500/10000。
檢測(cè)目標(biāo)類(lèi)型:試劑盒。
檢測(cè)技術(shù):均相時(shí)間分辨熒光(HTRF)。
品牌:HTRF。
數(shù)量:1。
運(yùn)輸條件:干冰運(yùn)輸。
治療領(lǐng)域:腫瘤與炎癥。
規(guī)格尺寸:500/10000 檢測(cè)點(diǎn)數(shù)。
分析原理:
將細(xì)胞上清液、樣本或標(biāo)準(zhǔn)品直接分配到檢測(cè)板中,通過(guò) HTRF 試劑(384 孔低體積白色板或 Cisbio 低體積 96 孔板,20µL)進(jìn)行檢測(cè)。用 HTRF 供體和受體標(biāo)記的抗體預(yù)先混合,并在一個(gè)分配步驟中加入,以進(jìn)一步簡(jiǎn)化檢測(cè)程序。只需按比例調(diào)整每次添加的體積,該檢測(cè)就可以擴(kuò)展到 1536 孔格式。
分析數(shù)據(jù):
四參數(shù)邏輯(4PL)曲線(xiàn)通常被推薦用于擬合酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定(ELISA)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。與線(xiàn)性分析相比,這種回歸能夠在更寬的濃度范圍內(nèi)準(zhǔn)確測(cè)量未知樣本,使其非常適合用于分析細(xì)胞因子釋放等生物系統(tǒng)。
分析細(xì)節(jié):
人 IFN gamma 試劑盒的技術(shù)規(guī)格:
樣本量:16µL。
最終檢測(cè)體積:20µL。
試劑盒組成:凍干標(biāo)準(zhǔn)品、冷凍檢測(cè)抗體、緩沖液和方案。
檢測(cè)限和定量限(在稀釋液中):14pg/mL 和 21pg/mL。
范圍:21 – 4000pg/mL。
出結(jié)果時(shí)間:室溫下過(guò)夜。
校準(zhǔn):NIBSC(82/587)值(IU/mL)= 0.019×HTRF 人 IFNγ 值(pg/mL)。
物種:僅人類(lèi)。
分析性能:
批內(nèi)和批間:
批內(nèi)(n = 24):對(duì) 3 個(gè)樣本中的每個(gè)樣本進(jìn)行了 24 次測(cè)量,并計(jì)算每個(gè)樣本的變異系數(shù)(% CV)。
批間(n = 4):在 4 個(gè)不同的實(shí)驗(yàn)中對(duì)每個(gè)樣本進(jìn)行測(cè)量,并計(jì)算每個(gè)樣本的變異系數(shù)(% CV)。
稀釋線(xiàn)性:從這些實(shí)驗(yàn)中獲得的出色的回收率百分比顯示了該檢測(cè)的良好線(xiàn)性。
加標(biāo)回收:將相同量的重組細(xì)胞因子添加到 2 個(gè)不同的血清樣本中,并將從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)獲得的一組響應(yīng)與計(jì)算的預(yù)期值進(jìn)行比較。觀察到的約 100% 的回收率驗(yàn)證了用于該檢測(cè)的樣本基質(zhì)。
分析驗(yàn)證:
用佛波酯(PMA)和離子霉素刺激的外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)中的 IFNγ 分泌:將 PBMC 以 50、100、200 和 400 千個(gè)細(xì)胞 / 孔的密度接種,用添加到 500ng/mL 離子霉素溶液中的不斷增加濃度的 PMA(0、1、50ng/mL)刺激 3 小時(shí)。然后將 16µL 上清液轉(zhuǎn)移到白色檢測(cè)板(384 孔,低體積)中,用人 IFNγ 檢測(cè)試劑盒進(jìn)行分析。