目錄:杭州新喬生物科技有限公司>>熒光探針>> 熒光探針Fluo-8, AM 鈣熒光探針Fluo-8, AM
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 規(guī)格 | 10mg |
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主要用途 | 科研實驗 |
[ Fluo-8, AM ] 鈣熒光探針Fluo-8, AM
[ Fluo-8, AM ] 鈣熒光探針Fluo-8, AM
中文名:鈣熒光探針Fluo-8, AM
英文名:1-[2-Amino-5-(6-hydroxy-3-oxo-9-xanthenyl)phenoxy]-2-(2-amino-5-methylphenoxy)ethane-N,N,N’,N’-tetraacetic acid, pentaacetoxymethyl ester
分子式:C51H52N2O23
分子量:1060.30
性質(zhì):
1. 外觀:橙紅色粉末
2. 純度:≥90%(HPLC)
3. 產(chǎn)品描述:
Fluo-8, AM是常用的檢測細胞內(nèi)鈣離子濃度的熒光探針之一。它穿透細胞膜進入細胞后被細胞內(nèi)的酯酶剪切形成Fluo-8,從而被滯留在細胞內(nèi),Fluo-8若以游離配體形式存在時幾乎是非熒光性的,但是當它與細胞內(nèi)鈣離子結(jié)合后可以產(chǎn)生較強的熒光,大激發(fā)波長為490nm,大發(fā)射波長為514nm??梢允褂眉す夤簿劢癸@微鏡或流式細胞儀檢測細胞內(nèi)鈣離子濃度的變化。
4. 操作說明(for Human T cells)*
(1) 試劑
2 mM的Fluo-8, AM/DMSO(將1mg Fluo-8, AM溶于442µL DMSO)
Pluronic F127
Hanks•balanced salt solution(HBSS)
HEPES buffer saline(10mM HEPES,1mM Na2HPO4,137mM NaCl,5mM KCl,1mM CaCl2,0.5mM MgCl2,5mM glucose,0.1% BSA,pH 7.4)
(2) 操作
①. 向Fluo-8, AM/DMSO溶液中加入16.5mg Pluronic F127,Pluronic F127可以 防止Fluo-8, AM在HBSS中聚合并能幫助其進入細胞。
②. 用HBSS稀釋Fluo-8, AM溶液,制備4µM的Fluo-8, AM工作液。
③. 將Fluo-8, AM工作液加入細胞,在37℃培養(yǎng)20分鐘。
④. 加入5倍體積的含有1%胎牛血清的HBSS,再繼續(xù)培養(yǎng)40分鐘。
⑤. 用HEPES buffer saline洗滌細胞3次,然后用HEPES buffer saline使細胞重懸浮,制成1×105 cells/mL的溶液。
⑥. 37℃下培養(yǎng)10分鐘,然后用該細胞進行熒光鈣離子檢測。激發(fā)波長490nm,發(fā)射波長514nm。
*標記的條件因細胞種類而異,在每次實驗前,請先確定條件。以上方法僅供參考。
儲存條件:-20℃干燥避光保存,有效期一年。
供應(yīng)商:杭州新喬生物科技有限公司
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訂購說明:
1、大部分產(chǎn)品有現(xiàn)貨,正常情況下都能當日發(fā)貨。
2、部分非常用產(chǎn)品,根據(jù)合成難易程度,貨期2-4周,海外期貨則需要提前3-6周預(yù)訂。
3、部分產(chǎn)品價格會因貨期、批次等因素發(fā)生變化,若有變動以訂貨當日新價格為準。
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極低溫產(chǎn)品:極低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝干冰,再用泡沫盒密封,放入的箱子,然后交付給合作快遞,安全快速的送至您的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一。
低溫產(chǎn)品:低溫產(chǎn)品運輸過程中加裝冰袋,再用泡沫盒密封,再放入的箱子(保溫效果少可以持續(xù)一周),然后交付給合作快遞,安全快速的送至您的手中,保證產(chǎn)品的性質(zhì)穩(wěn)定如一。
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