常用的c18液相色譜柱,當拿到新的C18柱時應(yīng)該怎樣進行活化及維護?為什么要這樣做?
新柱活化,實際上是一個平衡的過程,除了用流動相平衡外,有時候還必須用所測樣品對新柱進行平衡。特別是測定分子量比較高的多肽,尤其重要。因為分子量高的物質(zhì)分子,擴散速度慢,平衡所需時間也相應(yīng)較長。
具體平衡方式也很簡單,多進幾次測試樣品,直到峰面積和保留時間穩(wěn)定,再進行正式進樣測定。
如果要加快平衡時間,把前面用來平衡的進樣樣品濃度加大,或者不等洗脫完成,連續(xù)進樣多針。用待測物對新柱平衡,目的是將硅膠基質(zhì)填料表面具有非特異性吸附的位點的吸附能力飽和掉。
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