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          抗體去除液(Western)
          • 抗體去除液(Western)
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          更新時間:2024-08-20 21:00:06

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          產(chǎn)品概述 product description 使用本產(chǎn)品可以對同一張膜進行多次Western Blot 檢測。在室溫條件下,將用過的膜浸泡在抗體去除液中30-60 分鐘,可在不影響抗原蛋白的情況下清除膜上結(jié)合的抗體。隨后,可以使用不同的抗體進行下一輪Western Blot 實驗,因而可利用同一張膜進行多次蛋白檢測。適宜從少量樣品多次檢測多種不同蛋白質(zhì)。采用這方法多次檢測同一張膜上的蛋白,能省去蛋白電泳和膜轉(zhuǎn)移等費時費力的步驟。用途: 清除硝酸纖維素膜或PVDF 膜上結(jié)合的抗體,不影響抗原蛋白。
          保存溫度
          2-8℃
          注意事項
          試劑拆封后請盡快使用完!
          有效期
          一年
          使用注意事項
          1、有許多因素影響抗體從膜洗脫,如膜類型、抗體類型和濃度及其與抗原結(jié)合特性。因此需要優(yōu)化抗體去除液中孵育膜的時間。
          2、確定膜上抗體是否去除與優(yōu)化抗體去除液孵育膜的時間:用ECL工作液孵育再生后的膜約1分鐘,然后進行X 光膠片曝光并顯影,可確定膜上的抗體是否去除。如膠片上顯示條帶,表明抗體未去除,應繼續(xù)將膜浸泡在抗體去除液中另外孵育30-60 分鐘。然后再次ECL 檢查膜上抗體是否去除。重復此步驟直到抗體去除并確定孵育時間。
          3、使用脫脂奶粉封閉的膜要比使用BSA 封閉的膜上的抗體更容易被去除下來。因此準備進行再生的膜,應該使用脫脂奶粉而不是BSA 封閉。
          4、盡量避免使用干燥保存的膜,干的膜上的抗體很難被去除干凈。
          5、PVDF 膜上使用的效果好于硝酸纖維素膜。
          6、使用非化學發(fā)光試劑進行的Western檢測,例如DAB,NBT/BCIP,不適用于本試劑。
          使用方法
          1、將膜充分浸泡于適當體積的抗體去除液中,室溫孵育15-30 分鐘并不時晃動。孵育時間的長短應根據(jù)實驗條件進行優(yōu)化。洗脫某些抗體需要較長的時間如30-60 分鐘。
          2、用鑷子取出膜,用自備Western Blot 洗滌緩沖液快速淋洗膜一次,然后用TBST洗膜3次,每次10分鐘。
          3、此時膜上抗體已去除膜已經(jīng)再生。用脫脂奶粉或BSA 封閉一小時,進行下一輪Western Blot 實驗。

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