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          目錄:上海貝博生物科技有限公司>>蛋白質(zhì)生物學(xué)>>蛋白提取和裂解>> 組織蛋白快速提取試劑盒（離心柱法）
          
		
          
	
          
    	
          
		
          
			
          組織蛋白快速提取試劑盒（離心柱法）
          
		
          
		
          
			
		
          
	
          
	
          
		
          
			
          
           				    
            
			        
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			                組織蛋白快速提取試劑盒（離心柱法）
			            
            
			        
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                      產(chǎn)品概述                                 product description                                                                                                                              貝博® BBproExtra® 組織蛋白提取試劑盒提供全套試劑，適用于從各種動(dòng)物組織樣本中提取總蛋白。提取過程簡(jiǎn)單方便。試劑盒所配離心柱用來有效去除非蛋白質(zhì)類雜質(zhì)，并非采用離心柱吸附蛋白質(zhì)。   本試劑盒含有的配方能夠有效溶解細(xì)胞膜組份，包括細(xì)胞質(zhì)膜、核膜和各種細(xì)胞器膜。本試劑盒含有的蛋白酶抑制劑混合物，阻止了蛋白酶對(duì)蛋白的降解，為提取高純度的蛋白提供了保證。   本試劑盒提取的蛋白可用于Western Blotting、蛋白質(zhì)電泳、免疫沉淀、ELISA、轉(zhuǎn)錄活性分析、Gel shift凝膠阻滯實(shí)驗(yàn)、酶活性測(cè)定等下游蛋白研究實(shí)驗(yàn)。   本試劑盒提取的蛋白為具有天然蛋白構(gòu)象的活性蛋白。   本試劑盒中不含有EDTA，與金屬螯和層析等下游應(yīng)用兼容。
					
          
					
					
                               
                                   
                                       保存溫度                         
                                   
                                       2-8℃                         
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       注意事項(xiàng)                         
                                   
                                       1.蛋白酶抑制劑未開蓋使用前也可以2-8℃儲(chǔ)存。開蓋使用后-20℃儲(chǔ)存。
          2.蛋白酶抑制劑在2-8℃低溫時(shí)是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
          3.試劑拆封后請(qǐng)盡快使用完！
                                   
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       有效期                         
                                   
                                       一年                         
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       檢測(cè)方法                         
                                   
                                       離心柱                         
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       適用樣本                         
                                   
                                       動(dòng)物組織                         
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       產(chǎn)品特點(diǎn)                         
                                   
                                       1、 使用方便。
          2、 含蛋白穩(wěn)定劑，提取的蛋白穩(wěn)定。
          3、 紫外檢測(cè)蛋白濃度時(shí)，背景干擾低。
          4、 蛋白酶抑制劑抑制了蛋白的降解，蛋白酶抑制劑配方優(yōu)化。蛋白酶抑制劑混合物包含6種獨(dú)立的蛋白酶抑制劑；每一種抑制劑可特異性抑制某一種或幾種蛋白酶活性。該混合物優(yōu)化的組成使其可以抑制幾乎所有重要的蛋白酶活性，包括蛋白酶、半酸蛋白酶、天冬氨酸蛋白酶、丙氨酰-氨基肽酶等。
                                   
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       產(chǎn)品應(yīng)用                         
                                   
                                       離心柱                         
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       儀器準(zhǔn)備                         
                                   
                                       1.離心機(jī)
          2.振蕩器
          3.渦旋混勻器
          4.移液器
          5.冰箱
          6.冰盒                          
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       試劑準(zhǔn)備                         
                                   
                                       1.PBS緩沖液 
          2.蛋白定量試劑盒                         
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       耗材準(zhǔn)備                         
                                   
                                       1.離心管
          2.吸頭
          3.一次性手套                         
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       使用注意事項(xiàng)                         
                                   
                                        使用注意事項(xiàng)：
          ? 旋帽離心管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心，將蓋內(nèi)壁上的液體甩至管底，避免開蓋時(shí)液體灑落。
          ? 蛋白酶抑制劑在2-8℃時(shí)是固體狀態(tài)，從冰箱取出后恢復(fù)至室溫或37℃短時(shí)間水浴，變成液體狀態(tài)后離心至管底部再開蓋。
          ? 實(shí)驗(yàn)過程中的所有試劑須預(yù)冷；所有器具須放-20℃冰箱預(yù)冷。整個(gè)過程須保持樣品處于低溫。
          ? 蛋白酶抑制劑儲(chǔ)存期間溶液如果出現(xiàn)沉淀，不影響使用，溶解后正常使用。
          ? 如果試劑盒不能短時(shí)間內(nèi)用完，蛋白酶抑制劑混合物不可以一次全部加入提取液。
          ? 可以根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)需要加入其它蛋白酶抑制劑單品。
          ?
                                   
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       使用方法                         
                                   
                                       1. 提取液制備：
          每500ul蛋白提取液中加入2ul蛋白酶抑制劑混合物和2ul蛋白穩(wěn)定劑，混勻后置冰上備用。
          2. 取50-100mg組織，用PBS洗干凈。然后用刀剪碎，加入500ul蛋白提取液，用組織勻漿器/勻漿機(jī)勻漿至無明顯肉眼可見固體。
          3. 將組織勻漿吸入一預(yù)冷的干凈離心管中，在4℃條件下振蕩10-20分鐘。
          4. 套上液體收集管，將提取液吸入蛋白離心管內(nèi)管中，在4℃，10000g條件下離心5分鐘。
          5. 收集套管內(nèi)液體即得到組織總蛋白。
          6. 將上述蛋白提取物定量后分裝于-80℃冰箱保存?zhèn)溆没蛑苯佑糜谙掠螌?shí)驗(yàn)。

          凍存樣本：
          1. 凍存組織樣本參照上述組織樣本步驟操作。
          2. 凍存樣本不用PBS洗滌，直接加入蛋白提取液處理即可。
                                   
                               
                           
                                                                           
                               
                                   
                                       常見問題分析                         
                                   
                                       1.細(xì)胞裂解速度慢？
          為了充分保證提取得到的蛋白的活性，提取液采用的保護(hù)蛋白的配方，裂解能力溫和，下游應(yīng)用范圍廣。適當(dāng)延長裂解的時(shí)間即可。
          2.蛋白濃度低？
          處理部分組織樣本時(shí)可能沒有裂解，導(dǎo)致蛋白濃度低。只要適當(dāng)延長試劑A的處理時(shí)間即可。在持續(xù)振蕩的條件下處理，沒有振蕩器也可間隔幾分鐘用吸頭吹打混勻。
          3. 用什么方法定量蛋白？
          建議用BCA法。不適合用Bradford法，因?yàn)樵噭〢中含有干擾Bradford法的組份，導(dǎo)致定量不準(zhǔn)。如果已經(jīng)進(jìn)行過透析處理或者用脫鹽柱改換過緩沖體系，則可以用Bradford法定量。
          4.提取的蛋白具有活性嗎？
          本試劑盒不含有離子型去垢劑組份，不破壞蛋白的結(jié)構(gòu)，沒有對(duì)蛋白質(zhì)之間原有的相互作用的破壞，蛋白均保持其天然構(gòu)象和活性。
                                   
                               
                           
                                                                                       
          

                                                                                    				
          

			
          
		
          
	
          
	
          
	
	
	 		 
	
          
		
          
			
          
				
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